不同熒光標記的方法的優(yōu)點-顯微鏡植物標本的制備
信息分類：生命科學資訊 作者:YIYI發(fā)布
不同熒光標記的方法的優(yōu)點-顯微鏡植物標本的制備
直接法—就是把熒光標記的抗體直接放在具有抗原的測試標本上，
該抗原和抗體，結(jié)合達到定位的目的。
間接法—就是先將從兔子提出來的抗體與抗原在測試標本上結(jié)合，
然后再用熒光標記了的抗兔抗血清與兔子抗體結(jié)合，從而達到定位的
目的。抗兔抗血清可以預先在綿羊或山羊體內(nèi)誘發(fā)制備，然后再加上
熒光標記。
間接法的優(yōu)點是能夠產(chǎn)生比直接法更強力的熒光。同時，由于標
記了的抗兔抗體已有商品供購買使用，無需自已制備，所以用間接法
來定位是比較方便，而用的人也是比較多的。
植物標本的制備
抗原與抗體的定位大多要在組織切片上進行。所以怎樣制備組織
切片使細胞的結(jié)構(gòu)基本保持完整無損，而同時又不影響抗原的活性，
是決定免疫熒光技術(shù)定位成功與否的一個關(guān)鍵環(huán)節(jié)。
大家都知道存在植物體內(nèi)的抗原分子，如果不經(jīng)“固定”
是很容易流失、擴散而造成假象的。但如果要把細胞抗原分子加
以“固定”，而同時又要在一定程度保持細胞結(jié)構(gòu)的完整性，就非得
用一些化學固定劑如戊二醛、甲醛等來固定細胞。
但假如在固定時，濃度、時間掌握得不好，是容易使抗原分子變
性，失去與抗體結(jié)合的能力的。所以在做免疫熒光時，首先得做幾個
測試實驗，看看應該用什么固定劑和濃度為最適合。除了這一個問題
之外，還需要注意另一個問題，那就是要看看所用的抗體是否能夠滲
入細胞與細胞內(nèi)的抗原結(jié)合。
本文由出自上海光學儀器廠，轉(zhuǎn)載請注明
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