使用倒置式
生物顯微鏡觀察培養(yǎng)皿毛細(xì)管結(jié)構(gòu)
透明膜(Zona Pellucida)移除
儀器
2. 細(xì)胞培養(yǎng)箱 (37℃,5% CO2)
材料
1. 未著床的胚胎 (以 morula aggregation 為例:取 2.5 dpc 的胚胎)
2. 聚合盤
3. 塑膠培養(yǎng)皿
4. 口吹式毛細(xì)管組
5. Acid Tyrode's solution (e.g., Sigma T1788)
6. M2 及 M16 培養(yǎng)液
實(shí)驗(yàn)步驟
1. 于塑膠培養(yǎng)皿中準(zhǔn)備數(shù)滴 M2 及 Acid Tyrode’s 溶液液滴。
2. 將胚胎置入 M2 液滴中。一次取 20~50 顆胚胎于 Acid Tyrode’s 液滴中清洗,待透明膜溶解后迅速將
胚胎置入 M2 液滴中清洗,重復(fù)此步驟將所有胚胎的透明膜清除。
3. 將胚胎以 M16 液滴清洗,將清洗后的胚胎置入聚合盤洞中培養(yǎng)(兩顆胚胎與胚胎干細(xì)胞團(tuán)進(jìn)行融合)