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顯微鏡研究DNA所用樣品的制備實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)介

信息分類：生命科學(xué)資訊　　　　作者:YIYI發(fā)布　

干細(xì)胞轉(zhuǎn)染用標(biāo)的載體DNA制備

1. 標(biāo)的載體質(zhì)體DNA的抽取

（a）核心建議使用“CsCl banding”抽取標(biāo)的載體DNA，

（b）本核心也接受以Endofree Plasmid Maxi Kit（Qiagen）制備的DNA。

2. 標(biāo)的載體DNA直線化

（a）交至核心的標(biāo)的載體DNA需直線化。作法是取200 mg DNA（依“步驟1”制備）經(jīng)適當(dāng)?shù)南拗泼盖懈詈螅?/div>

經(jīng)電泳分析確定完全直線化后，用phenol萃取兩次，接著用chloroform萃取兩次后，

加入1/20（vol.）5M NaCl，混合均勻后，加入2倍100％酒精沉淀，

最后將酒精沉淀的DNA送交核心進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

（b）另外，再同時(shí)交予核心200 mg未經(jīng)直線化DNA（依“步驟1”制備）

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