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偏光顯微鏡的偏極光觀察無需染色的細(xì)胞有哪些特點

信息分類：生命科學(xué)資訊　　　　作者:YIYI發(fā)布　

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偏光顯微鏡的偏極光觀察無需染色的細(xì)胞有哪些特點

Digitonin（洋地黃）反應(yīng)
 染色機轉(zhuǎn)
  此法可使用未酯化之膽??固醇。 Digitonin為天然存在之Glncoside，
  其與未酯化之膽??固醇行成結(jié)晶狀之沉淀復(fù)合物。
  染色方法
  1、以10 %中性Formalin緩沖液固定或用新先標(biāo)本。
  2、冷凍切片，6 ~ 8μm厚度切之。
  3、將切片置于0.5 % Digitonin Solution數(shù)小時。
  4、以50 % Alcohol洗滌之。
  5、將切片一部份以Sudan Ⅳ or Oil Red O作對比染色。
  6、以Apathy's Gum Syrup or Glycerin Gelatin固封。
  染色結(jié)果
  以偏光顯微鏡偏極光觀察未作對比染色部份。其形成針狀或成束之Cholesteryl
  Digitonides。對于此染色部份，膽固醇具雙折光性不呈染色
  但膽固醇酯可被油溶性染料染色而喪失其雙折光性。
  其結(jié)果不溶于95 % Alcohol、Acetone、Ethyl Ether or Water，
  惟溶于熱Alcohol & Methyl Metanol，易溶于Glacial Acetic Acid
  而極易溶于Pyridine & Chloral Hydrate。
  本法用藥 0.5 % Digitonin in 50 % Alcohol
內(nèi)在HRP之存在會造成困難，尤其于固
定組織之染色時。使用冷凍切片時，大部份紅血球會因HRP
溶血而消失，其于白血球之存在，可由戲胞而辨知。
一般使用內(nèi)在HRP滅活化之方法為將
切片以甲醇與過
氧化氫混合液處理。此法不影響免疫球蛋白之染色，但是影
響抗原之染色則須加以測試。

本文由出自上海光學(xué)儀器廠，轉(zhuǎn)載請注明
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