生物顯微鏡采用哪種細(xì)胞標(biāo)本制備-生物實驗
應(yīng)該說明,
光學(xué)顯微鏡術(shù)與電子顯微鏡術(shù)在細(xì)胞標(biāo)本的
制備上是有差別的,這是由于采用輻射特性不同所決定的�?�
見光容易穿過完整細(xì)胞或以切片機切成厚度5-10微米的細(xì)
胞,而常用電壓所產(chǎn)生的電子可被這樣厚度的標(biāo)本全部吸收,
所以,細(xì)胞必須切成厚度約100埃才能觀察。電子顯微鏡術(shù)
方面,超薄切片機用金剛鉆刀或玻璃刀切片,為此,細(xì)胞要
用塑料包埋,而不是光學(xué)顯微鏡切片慣用的石蠟包埋。
不管采用哪種儀器或采用哪種細(xì)胞標(biāo)本制備方法進行觀
察,都要求能把細(xì)胞的各個部分與其周圍環(huán)境明顯區(qū)別開來。
電子顯微鏡可以呈現(xiàn)這樣的反差,因為細(xì)胞某些結(jié)構(gòu)比
另一些結(jié)構(gòu)具有或可使具有更大的電子“密度”,電子通過標(biāo)
本的沖擊使感光底片變黑。由于電子散射的程度是原子質(zhì)量
的函數(shù),還由于有機物質(zhì)中輕的原子(如氫、碳、氮及氧)幾乎
沒有散射能力,于是用重金屬(常用餓、秘、鈾、錳)使細(xì)胞不同
部分選擇性“染色”以顯示反差。光學(xué)顯微鏡同樣不容易顯示
反差,因為細(xì)胞的大部分是透光的。為了克服這一障礙,細(xì)胞
學(xué)家用適當(dāng)?shù)臍⑺绖?固定劑),并選擇性將細(xì)胞不同部分染
色作觀察。