顯微鏡下用微小玻璃針挑出微量的白血球細胞實驗
信息分類：生命科學資訊 作者:YIYI發(fā)布
顯微鏡下用微小玻璃針挑出微量的白血球細胞實驗
DNA檢品量過少，再經(jīng)DNA萃取純化后，檢品DNA往往已漏失不見的困擾，
盡管PCR技術理論上應可將極微量的DNA做等比級數(shù)的擴大，但漏失不完整的、
甚至是完全漏失DNA的檢品，就算是使用目前最受囑目并廣泛運用于人別鑒定的short tandem repeats（STR），
雖有其DNA長度較短、較容易PCR復制的優(yōu)點，也常常無法得到完美的STR 基因座分型結(jié)果。
解決微量證物的DNA檢出不良情形，曾實驗以顯微注射系統(tǒng)，
在顯微鏡下用特殊微小玻璃針挑出檢品中微量的白血球細胞， 舍棄一般傳統(tǒng)標準的DNA萃取方式，
利用熱漲冷縮的原理將細胞DNA釋放出來，經(jīng)PE Applied Biosystems公司出品的STR AmpFlSTR Cofiler Kit試驗，
其基因座包括D3S1358、D16S539、TH01、TPOX、 CSF1PO 、D7S820及可辨別性別的Amelogenin，
在初步的研究發(fā)現(xiàn)，在單一細胞PCR的Cofiler STR分型的實驗中，大多數(shù)的基因座型別可被成功分型出來，
但也有些異合子（Heterozygous loci）基因座型別因優(yōu)勢的PCR復制產(chǎn)生基因型漏失或因復制不全導致基因型
增多等基因座型別失真的現(xiàn)象，幸運的是并非所有的單一細胞PCR皆會產(chǎn)生基因型漏失或基因型增多的失真現(xiàn)象，
所以多次重復做單一細胞PCR的分析將可得到較正確的結(jié)果，
單一細胞PCR Cofiler STR分型的實驗中雖未能得到穩(wěn)定的結(jié)果，但將此技術使用粒線體DNA的定序分型上，
卻有明確及穩(wěn)定的結(jié)果可供鑒定。另外將白血球細胞數(shù)提高至10至30個來進行Cofiler STR的微量細胞PCR分型，
所有的基因座型別皆可穩(wěn)定正確的表現(xiàn)出來，建立在上述的研究基礎上，
本文由出自上海光學儀器廠，轉(zhuǎn)載請注明
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