觀察細(xì)胞
顯微鏡-植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)時(shí)容易發(fā)生絮聚現(xiàn)像
植物細(xì)胞通常相當(dāng)大(相對(duì)于微生物而言)且其細(xì)胞壁叫粗糙,培養(yǎng)植物細(xì)胞時(shí)細(xì)胞之形狀及大小差異很大,
不像其他微生物,植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)時(shí)容易發(fā)生絮聚現(xiàn)像,絮聚體結(jié)構(gòu)對(duì)于二次代謝物之制造會(huì)產(chǎn)生不良效果,
如影響生物反應(yīng)器攪拌使細(xì)胞分散不能均勻,且絮聚體內(nèi)之微環(huán)境和外界不一致,則使反應(yīng)器之操作更為困難。
這些絮聚體之直徑可以大到 2 mm,其內(nèi)包含數(shù)千個(gè)細(xì)胞,絮聚體之形成為細(xì)胞分裂時(shí)無(wú)分散開(kāi)之細(xì)胞,
或其他未知原因之細(xì)胞聚絮,但其共通性為結(jié)構(gòu)組織松散,其平均大小及分佈可因培養(yǎng)環(huán)境而改變。
大體積及粗糙之細(xì)胞壁使植物細(xì)胞對(duì)剪力的敏感度增加,剪力為流體與流經(jīng)物體之表面所產(chǎn)生的作用力,
流體之速度斷面由生物反應(yīng)之?dāng)嚢枞~產(chǎn)生,而細(xì)胞處于此種速度斷面下將受剪力傷害,
因此以生物反應(yīng)器培養(yǎng)植物細(xì)胞,初期通常將攪拌速度降低以減輕剪力所造成的傷害。
植物細(xì)胞之生長(zhǎng)率很慢,倍數(shù)增加需2-3天或更久,因此其氧氣的需求度相當(dāng)?shù)停?/div>
但這也使得植物細(xì)胞生物反應(yīng)器培養(yǎng)需要2-3星期時(shí)間,故如何使生物反應(yīng)器能長(zhǎng)時(shí)間保持無(wú)菌狀態(tài)是其重點(diǎn)所在,
若反應(yīng)器受微生物感染,微生物將在短時(shí)間內(nèi)生長(zhǎng)超過(guò)植物細(xì)胞,則先前之培養(yǎng)將付之一炬。
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