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光學(xué)顯微鏡檢檢體的準備以及染色的一些問題?不染色觀察的方法

信息分類:生命科學(xué)小百科    作者:YIYI發(fā)布 

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光學(xué)顯微鏡檢檢體的準備以及染色的一些問題?

微生物不論染色與否,均可在顯微鏡下觀察,未染色的觀察方法有二﹕

1、濕抹片檢查(wet mount)﹕先加一滴水或生理食鹽水(saline)于載玻片上,再將檢體涂抹在水中,覆蓋一片蓋玻片,然后置于顯微鏡下觀察。濕抹片檢查法可以觀察到細菌的大小和形狀、部份的微細結(jié)構(gòu)和微生物的運動性。濕抹片檢查可以使用明視野鏡檢,也可以使用暗視野鏡檢。

2、懸滴法(hanging drop method)﹕先將一滴檢體滴于蓋玻片上,然后翻過來蓋在中央有凹槽的載玻片上,使水滴自由懸浮于蓋玻片下,允許其中微生物自由運動,此懸滴法主要用途是觀察微生物的鞭毛運動情形。

此外,細菌表面或內(nèi)部有某些構(gòu)造可與染劑發(fā)生離子交換,當染劑中帶顏色的染劑離子與細菌結(jié)構(gòu)的離子產(chǎn)生交換,便可以將細菌的特殊結(jié)構(gòu)染色。染色的目的有
(1)鑑定不同菌體之形態(tài);
(2)鑑別不同菌體之結(jié)構(gòu);
(3)提高顯微鏡的解像能力。

染劑的種類依帶電荷分為﹕
(1)酸性染劑 – 用于堿性結(jié)構(gòu)的染色,例如細胞質(zhì)之染色;
(2)堿性染劑 – 用于酸性結(jié)構(gòu)的染色,例如細胞核和細胞粒;
(3)中性染劑 – 缺乏可解離的化學(xué)基,所以多數(shù)可與脂肪結(jié)合。
另外所謂媒染劑(mordant),意指可與染劑形成不溶性物質(zhì)者,常先染劑用于檢體,以增加染劑對檢體之親和力,常使用的例子是鞭毛的染色
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