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顯微鏡百科 -利用SRS顯微鏡制作無標(biāo)記化學(xué)影片成為可能

利用SRS顯微鏡制作無標(biāo)記化學(xué)影片成為可能

信息分類:新聞中心  日期: 2011-6-3 10:18:04

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SaarFreudig與Xie這篇論文的共同作者是哈佛大學(xué)化學(xué)與化學(xué)生物學(xué)系的GariR.Holtom與佛蒙特州貝勒斯福爾斯的克羅瑪技術(shù)公司的JaiReichman與C.MichaelStanlei德國(guó)勃林格殷格翰醫(yī)學(xué)研究基金會(huì)(BoehringIngelheimFond比爾與梅琳達(dá)?蓋茨基金會(huì)與國(guó)立衛(wèi)生研究院為其研究工作提供了資金。

這一新技術(shù)的基礎(chǔ)是受激拉曼散射(SRS可與核磁共振成像(MRI相輔相成。捕獲細(xì)胞內(nèi)蛋白、脂質(zhì)與水的視頻圖像。廣泛應(yīng)用于捕獲器官、腫瘤以及其它大型結(jié)構(gòu)的靜態(tài)圖像。本研究首次使利用SRS顯微鏡制作無標(biāo)記化學(xué)影片成為可能:亞細(xì)胞水平拍攝流水線式的連續(xù)鏡頭。

哈佛大學(xué)化學(xué)與化學(xué)生物學(xué)教授Xie說:十一年前我剛開始著手進(jìn)行這項(xiàng)計(jì)劃時(shí)。而我現(xiàn)在就期望將SRS顯微鏡投入到醫(yī)院使用了很清楚,怎么也想不到會(huì)有如此令人驚異的結(jié)果。MRI技術(shù)是搞了三十年以后才得以應(yīng)用于臨床。受激拉曼散射將在未來的生物成像與醫(yī)學(xué)診斷中扮演一個(gè)重要的角色。

Xie說SRS顯微鏡能夠有助于外科移除腫瘤與其它損傷組織手術(shù)并使手術(shù)的速度加快。外科醫(yī)師現(xiàn)階段必需切取樣本以供組織學(xué)檢查—這一過程要花20分鐘左右—期間病人必需躺在手術(shù)臺(tái)上(活受罪)而SRS顯微鏡可以通過實(shí)時(shí)掃描來提供等效的信息。

Xie研究小組已經(jīng)運(yùn)用SRS顯微鏡來追蹤藥物在皮膚內(nèi)的遷移情況。該技術(shù)也能逐層觀察(活體)組織的三維結(jié)構(gòu)。可以清楚地觀察到局部用藥后藥物的吸收情形。結(jié)合運(yùn)用內(nèi)窺鏡。

Xie指出:此前的SRS顯微鏡每分鐘僅捕獲一個(gè)圖像。太慢,對(duì)動(dòng)物或人類活體而言。所以沒有實(shí)用價(jià)值。能夠使收集數(shù)據(jù)的速度提高三個(gè)數(shù)量級(jí)以上,使之以視頻速率成像。

因?yàn)镾RS顯微鏡通過偵測(cè)原子之間化學(xué)鍵的固有振動(dòng)來完成工作。MRI穿透深度偏向適用于器官及深居體內(nèi)的其它大型目標(biāo)成像。因此無須侵入性熒光標(biāo)記。這是一種與MRI互補(bǔ)的光學(xué)技術(shù)。

目前這一工作通過在一個(gè)小孔徑(通過該孔徑光束對(duì)準(zhǔn)被檢組織)周圍重新布置光電探測(cè)器而極大的推進(jìn)了對(duì)信號(hào)(由體內(nèi)組織反射散射)探測(cè)能力。利用這一方法。較此前的SRS顯微鏡技術(shù)方法提高了30倍�?茖W(xué)家能夠收集并分析對(duì)準(zhǔn)生物樣本的大約30%激光。

目前科學(xué)家運(yùn)用各種各樣的技術(shù)來觀察生物分子。SRS則成功地繞過了這些障礙。用綠色熒光蛋白(GFP作標(biāo)記可提供鮮明的圖像,但大多數(shù)都受到很大的限制。但是這種蛋白的塊頭太大,對(duì)塊頭小得多的生物分子來說太霸道,從而干擾了生物體內(nèi))精密的生物通道。激進(jìn)紅外探測(cè)(IR顯微鏡低空間分辨率低,需要脫水樣本,而自發(fā)性拉曼顯微鏡則需要高功率激光與很長(zhǎng)的積分時(shí)間,因而限制了其在活體標(biāo)本上的運(yùn)用。相干反斯托克斯拉曼散射(CA RS顯微技術(shù)則由Xie自己的研究團(tuán)隊(duì)率先開發(fā),對(duì)脂質(zhì)以外的大多數(shù)分子進(jìn)行成像時(shí)對(duì)比度不足。

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