酵母菌基因工程技術(shù)(Saccharomyces cerevisiae Biotechnology)

酵母菌是真核細(xì)胞基因工程的基本研究工具, 有如E.Coli之于原核細(xì)胞一般.

酵母菌(baker's yeast)在培養(yǎng)液中, 約90分鐘分裂一次, 且在有氧, 無氧環(huán)境均可成長.

酵母菌有16個(gè)直線型染色體(單套), 最小的200Kb, 最大的2,200Kb, 且有關(guān)染色體複製的起始點(diǎn)(Origins of replication) (ARS elements), 中心粒(centromeres, CEN elements)及末端段(telomeres)均已被嫁接出來. 其telomeres含有5dG-3dT3的重複片段.同時(shí)人工染色體也由此倍製造出來, 而且也設(shè)計(jì)成可以在E.Coli及yeast中均可成長的shuttle vectors(巴士嫁接媒介).

酵母菌可分成α或a型, 單套酵母菌可分泌α或a蛋白質(zhì)來誘導(dǎo)"交配"成雙套.

酵母菌有的也含有質(zhì)體, 有的亦含有病毒.

酵母菌的成長, 在培養(yǎng)液中達(dá)到5×107cells/ml~2×108cells/ml為飽和, 通常用YPD(teast extract, peptone, dextrose)或稱YEPD medium.

YPD medium配方：

每公升含10g teast extract

20g peptone

20g dextrose

保存teast, 可用每支含1ml的30﹪glycerol(消毒過)試管, 加入1ml yeast液, 保存在-70℃, 或1ml yeast液中, 加入80μl的DMSO, 保存在-70℃.