信息分類:生命科學(xué)資訊 作者:yiyi發(fā)布
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細(xì)菌DNA的抽提的方法和步驟有?
詳細(xì)說明:新的數(shù)碼顯微鏡目鏡是一種廉價的方式,只是升級成數(shù)碼顯微鏡任何的立體聲或復(fù)式顯微鏡。這種結(jié)合的數(shù)碼相機(jī),內(nèi)置10X目鏡是一個偉大的方式預(yù)
細(xì)菌DNA的抽提
使用Quantum Prep AquaPure Genomeic DNA Kit萃取細(xì)菌DNA
1. 取E.coli overnight culture 500μl, 置入1.5ml離心管, 置冰上, 離心10,000rpm 15sec, 吸除上清液, 再加入300μl genomic lysis buffer, 使細(xì)菌充份溶解, 置80℃水浴或hotblock上, 5min.
2. 將上述離心管置室溫5min, 加入1.5μl RNase solution,充份溷合,置37℃, 45min, 再將上述離心管置室溫5min, 再加入100μl protein precipitation solution, vortex 30sec, 離心11,000rpm, 3min.
3. 保留上清液于另一個1.5ml離心管中, 加入300μl 100﹪isopropanol, 充份溷合, 離心13,000rpm, 2min, 倒去上清, 以300μl 70﹪酒精緩洗沉淀之DNA, 離心13,000rpm, 1min, 倒去上清, 瀝乾.
4. 加入50~100μl DNA hydration buffer, 置65℃水浴或hotblock上, 5~30min. 使DNA充分溶解. 保存于-20℃.
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