相差顯微鏡和熒光顯微鏡共觀察,檢測凋亡細胞
根據(jù)凋亡細胞染色質(zhì)凝集、邊緣化、細胞質(zhì)出泡和產(chǎn)生凋亡小體等形態(tài)
特征,不染色即可在相差顯微鏡下觀察到這些形態(tài)上的變化。特別再配合
Ho.33342特異性DNA的熒光探針標(biāo)記,同時可在熒光顯微鏡下明確地觀察
到由藍色熒光指示出的染色質(zhì)等形態(tài)上的變化。
電鏡形態(tài)學(xué)觀察
(1)掃描電鏡:主要用來觀察細胞的表面形態(tài)。細胞凋亡時體積縮小,
表面微絨毛減少或完全消失,有許多小泡或球狀凋亡小體。這些特征性變化
可通過掃描電鏡觀察到。正常細胞表面有微絨毛,無小泡或球狀凋亡小體出
現(xiàn)。
(2)透射電鏡:透射電鏡主要用來觀察細胞的超微結(jié)構(gòu)。細胞凋亡時細
胞表面微絨毛減少或完全消失,染色質(zhì)凝集、電子密度增高,呈新月形或塊
狀靠近核膜邊緣,核裂解,細胞膜包裹著裂解的核碎片或內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體、
高爾基體等其他細胞結(jié)構(gòu)形成凸起于細胞表面的凋亡小體,所以胞質(zhì)內(nèi)細胞
器結(jié)構(gòu)不清。但整個過程中細胞膜、溶酶體膜保持完整。這些凋亡細胞內(nèi)部
發(fā)生的各種特征性形態(tài)變化均可通過透射電鏡觀察到。正常細胞表面有微絨
毛,核大,核仁明顯,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體、高爾基體等結(jié)構(gòu)清晰。