樣品碳涂層細微結(jié)構(gòu)可在電子
顯微鏡進行觀察
最終樣品準(zhǔn)備
樣品使用臨界點干燥機充分干燥。操作時注意避免由于風(fēng)干引起的樣品表面牽張而導(dǎo)致
由細絲網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)組成的超微結(jié)構(gòu)被破壞。
4.臨界點干燥。根據(jù)儀器說明書將載網(wǎng)轉(zhuǎn)移到臨界點干燥機內(nèi)的100%(休積分數(shù))的
乙醇中。在樣品上有一層碳附著的時候保存網(wǎng)格。
r.碳涂層(可選但推薦)。當(dāng)干燥的時候,載網(wǎng)可在電子顯微鏡進行觀察.但此時樣
品很容易受損。使用標(biāo)準(zhǔn)的碳涂層儀在樣本上輕輕涂一層碳可使樣木保持穩(wěn)定。
B.方法二:非樹脂切片
這種方法適用于觀察交聯(lián)穩(wěn)定的核基質(zhì)法,或者經(jīng)典的核基質(zhì)法。提取的細胞核基
質(zhì),以顯示分支絲的潛在網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)。也適用于其他結(jié)構(gòu)的觀察,例如細胞骨架及其他標(biāo)本。
使用特定的抗體和膠體金標(biāo)記的二抗可以在細胞核叢質(zhì)或者細胞骨架上定位特定的蛋白質(zhì)。
非樹脂切片是一種用蜂蠟(硬脂酸乙二醇醋)浸潤細微結(jié)構(gòu)以便在進行切片的時候給予那些
脆弱的結(jié)構(gòu)以支撐的技術(shù)。薄切片制備完成后,蜂蠟會被去除,只留下保護得很好的結(jié)構(gòu)而
沒有任何包埋材料的殘留。
這種方法結(jié)合了全細胞包埋直接觀察三維結(jié)構(gòu)和切片的優(yōu)點。切片對于觀察內(nèi)在的細胞
核結(jié)構(gòu)非常重要,而這常常在全細胞包埋時被核膜所掩蓋。和全細胞包埋相同,非樹脂切片
尤其適合于進行立體圖像的采集。