被測(cè)樣品產(chǎn)生熒光的幾種形式:
1.自發(fā)(原發(fā))熒光系指未經(jīng)處理的生物樣品被光
激發(fā)以后本身所發(fā)出的熒光,如葉綠素的紅色熒光。血紅
素、脂褐素、膠原纖維和彈力纖維等可產(chǎn)生自發(fā)熒光。
2.誘發(fā)熒光某些物質(zhì)本身并不產(chǎn)生熒光,經(jīng)過(guò)誘導(dǎo)
劑產(chǎn)生一定的化學(xué)反應(yīng),使組織中的物質(zhì)轉(zhuǎn)換為熒光物質(zhì),
3.熒光染料染色熒光組織經(jīng)用熒光染料染色,熒光
染料與細(xì)胞成分結(jié)合后所產(chǎn)生的熒光如副品紅、EB, PI染
DNA而產(chǎn)生的熒光。
4.酶誘發(fā)熒光通過(guò)細(xì)胞內(nèi)部酶的催化反應(yīng),使不發(fā)
勞光的底物轉(zhuǎn)換成為能發(fā)射熒光的產(chǎn)物,這樣就可以通過(guò)測(cè)
定熒光強(qiáng)度變化來(lái)測(cè)定酶的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)。
5.免疫熒光用熒光染料標(biāo)記抗體,二者以共價(jià)鍵結(jié)
合,使被標(biāo)記的杭體與抗原結(jié)合形成抗原一抗體復(fù)合物,
經(jīng)激發(fā)光照射后產(chǎn)生熒光,從而可達(dá)到辨認(rèn)未知抗原的目的。
細(xì)胞和組織內(nèi)的熒光需通過(guò)
熒光顯微鏡進(jìn)行觀察或通過(guò)
顯微分光光度計(jì)和FCM進(jìn)行定量測(cè)定。
不同的熒光染料產(chǎn)生不同頗色的熒光,其激發(fā)光的波長(zhǎng)
也不同,