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教學(xué)用生物顯微鏡-怎樣制樣植物細(xì)胞載玻片

信息分類：生命科學(xué)資訊　　　　作者:YIYI發(fā)布　

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教學(xué)用生物顯微鏡-怎樣制樣植物細(xì)胞載玻片

醋酸洋紅染色的方法

    1.取材一般在上午10時(shí)-11時(shí)，取生長(zhǎng)茂盛，新鮮的根部或莖尖，
并切取1 厘米左右的根尖或莖尖。為了獲得較多的分裂細(xì)胞，可將三
角瓶?jī)?nèi)小苗先置于10℃左右低溫一晝夜，第二天取出放于常溫下2-6
個(gè)小時(shí)，使細(xì)胞劇烈分裂，然后再行切取。

    2.前處理“將切下的根尖放入蒸餾水中，在0 ℃-3℃的條件下處
理12-24 小時(shí)�；蛴�0.2%秋水仙堿、飽和對(duì)二氯化苯，0.3M的8-羥基
喹寧，任選其一處理2-5 小時(shí)也可。至于那一種能獲得較好較多的分
裂相，達(dá)到染色體縮短和染色單體更加分散，而染色體輪廓得以清晰
的目的，需經(jīng)多次實(shí)驗(yàn)，才能找到

    3.固定一般用冰醋酸1 份，無(wú)水乙醉3 份，混合后配成固體液，
固定材料2-24小時(shí)如果不能在短時(shí)間內(nèi)觀察，可將固定的材料用95%
酒精洗凈其醋酸味，移入70% 酒精中，在陰涼處保存

    4.解離有2 種方法比較常用（1 ）將材料放入鹽酸酒精液（濃鹽
酸1 份+95 % 酒精1 份）中，處理約2-5 分鐘。時(shí)間過長(zhǎng)材料不易染
色，時(shí)間過短細(xì)胞不易分散。然后流水沖洗。

    （2 ）將固定后的材料，流水沖洗10分鐘，放入iNHC1 中，于60
℃下水解5-15分鐘。取出水洗。

    5.染色和壓片

    將解離后的材料，置載玻片上切取0.5-1 毫米，加一滴醋酸洋紅
染色，約10分鐘后即可壓片鏡檢。為了使染色效果更理想，最好能將
解離好的材料，置4%鐵礬液中媒染4-12小時(shí)，流水沖洗10分鐘，蒸餾
水浸洗2 次，然后滴染或者丟入醋酸洋紅液中染色4-24小時(shí)。

    加蓋玻片，左手按住蓋玻片勿使晃動(dòng)，用鑷柄輕擊蓋片下的材料，
使之成一均勻霧狀薄層。然后反復(fù)在酒精燈上加熱至近沸騰為止。

    6.鏡檢放顯微鏡下觀察，尋找分裂中期的細(xì)胞，進(jìn)行計(jì)數(shù)、照相。

本文由出自上海光學(xué)儀器廠，轉(zhuǎn)載請(qǐng)注明
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