免疫電子顯微鏡
盡管在細(xì)胞成像中熒光顯微技術(shù)發(fā)揮著重要的作用,然而熒光顯微鏡的
分辨率仍然低于電子顯微鏡(EM)�?墒�,掃描電子顯微鏡(SEM)研究顯示,
植物表面的生物膜是嵌在有機(jī)物質(zhì)上的多種異種微生物的復(fù)雜集合體。
對(duì)于研究者而言,令人失望的是電子顯微鏡下的植物上的絕大部分細(xì)菌
細(xì)胞仍然是未知的。
幸運(yùn)的是,免疫電鏡的膠體金標(biāo)記技術(shù)為自然環(huán)境中特定微生物的
檢測(cè)和揭示微生物細(xì)胞更為復(fù)雜的生物學(xué)現(xiàn)象提供了新的研究手段。
膠體金標(biāo)記技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)在于將分子原位定位的高特異性與掃描電鏡的
高分辨率結(jié)合起來(lái),故在植物病理學(xué)研究中得到了廣泛的應(yīng)用。
例如,在Envinia amylovora和Pseudomonas syringae與植物細(xì)胞的相互作用過(guò)
程中,研究者設(shè)計(jì)了精妙的電鏡實(shí)驗(yàn),提出了Hrp纖毛型分泌效應(yīng)蛋白的作用模
型。這些研究涉及利用不同尺寸的金顆粒進(jìn)行單標(biāo)記和雙標(biāo)記來(lái)檢測(cè)兩種蛋白,并用透
射電鏡來(lái)進(jìn)行觀察[67.681。將特異性抗Salmonella enterica Thompso。血清型的細(xì)胞與鞭毛
的單克隆抗體用金進(jìn)行標(biāo)記,結(jié)合使用掃描電子顯微鏡,在將該細(xì)菌接種于芫婪葉上之
后,研究者能得到Salmonella enterica Thompson血清型的高分辨率的顯微成像。更重要
的是,對(duì)鞭毛組分進(jìn)行免疫檢測(cè)使研究者能觀察到沙門菌Thompson血清型的鞭毛是錨
定在葉面上,這表明鞭毛的作用是使細(xì)胞a附千植物
除了免疫細(xì)胞化學(xué)外,研究者根據(jù)凝集素、酶和蛋白質(zhì)等對(duì)特定分子結(jié)合的特異性開發(fā)了
很多其他的細(xì)胞化學(xué)研究方法來(lái)用于電子顯微鏡的金標(biāo)記。