檢查型
熒光顯微鏡細(xì)胞培養(yǎng)常用的檢測方法有哪些
常用的檢測方法有培養(yǎng)法、熒光染色法(DNA染色法)、PCR法、電鏡觀察法。
培養(yǎng)法最為可靠且成本低廉,但培養(yǎng)周期較長常用于細(xì)胞以及臨床治療
細(xì)胞的支原體檢查。
熒光染色法(DNA染色法)用特異熒光染料(Hoechst 33258)染色后在
進行檢測.熒光染料(Hoechst 33258)是一種能和DNA特異結(jié)合物質(zhì)。
如果,檢測樣品為支原體污染,則附在細(xì)胞表面的支原體DNA著色,
在熒光顯微鏡下可見。
PCR法是一種體外DNA擴增實驗,其基本原理是酶促DNA合成反應(yīng),
即在DNA模板、引物和脫氧核糖核酸存在下,經(jīng)DNA聚合酶的作用,
使DNA鏈擴增延伸。該實驗具有靈敏度高、特異性強、快速的特點,
但其對實驗環(huán)境的要求嚴(yán)格,實驗成本較高,有時還有假陽性的現(xiàn)象出現(xiàn)。
利用電子顯微鏡的超級放大功能,可直接觀察培養(yǎng)細(xì)胞中支原體污染情況。