顯微鏡下細(xì)胞內(nèi)可觀察到骨骼肌特征
(1)因生長(zhǎng)中的肌肉組織中,骨骼肌單核前體細(xì)胞數(shù)量較多,
因此,為提高培養(yǎng)的成功率,培養(yǎng)所用的組織材料應(yīng)盡量取自動(dòng)物的幼體或胚胎
(2)因成肌細(xì)胞比非成肌細(xì)胞貼壁慢,可采用反復(fù)貼壁的方法,
減少原代培養(yǎng)中非成肌細(xì)胞的污染。
(3)良好的培養(yǎng)條件,如向培養(yǎng)基中加人胎牛血清、將細(xì)胞接種于明膠上等,
可避免培養(yǎng)的成肌細(xì)胞發(fā)生去分化的現(xiàn)象,促使其向成熟骨骼肌細(xì)胞轉(zhuǎn)變,
即:細(xì)胞間大量融合形成多核細(xì)胞、細(xì)胞發(fā)生自發(fā)性收縮等。
在接種后24h左右,大多數(shù)細(xì)胞已貼壁并開始增殖;經(jīng)培養(yǎng)2d后,
細(xì)胞進(jìn)人對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,細(xì)胞呈梭形,中央有單個(gè)胞核,胞質(zhì)透明度高。
隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng),細(xì)胞間開始發(fā)生大量的融合,
細(xì)胞的自發(fā)性收縮也逐漸變得明顯,顯微鏡下細(xì)胞內(nèi)可觀察到骨骼肌特征性橫紋的出