微生物型態(tài)觀察樣本制備實(shí)驗(yàn)簡介-學(xué)生專業(yè)
顯微鏡
簡單染色法 – 微生物型態(tài)觀察
原理:
微生物體積小且大都為透明,所以是肉眼無法觀察的生物。
科學(xué)家可藉由抹片固定及使用染劑染色的方法,
再配合以顯微鏡將微生物放大,以便進(jìn)行微生物型態(tài)及大小的觀察。
材料與方法
材料
1. 標(biāo)準(zhǔn)菌株:兩組共用一片活化的金黃色葡萄球菌 (Staphylococcus aureus)
營養(yǎng)培養(yǎng)基(nutrient agar,NA) 平盤及一片活化的大腸桿菌 ( Escherichia coli) NA平盤,
全班至少要活化 13片供全班使用。(使用 NA 活化兩種標(biāo)準(zhǔn)菌株) (26 片 NA 平盤)
2. 每組基本的無菌操作器材:顯微鏡、載玻片、蓋玻片、裝有無菌水(蒸餾水)的洗滌瓶、
95%酒精、酒精燈、打火機(jī)、接種環(huán)、玻片夾、簽字筆、結(jié)晶紫溶液、廢液回收燒杯、濾紙,各一或部分共用。
方法:
1. 載玻片先以95%酒精潤濕擦拭烘乾。
2. 將接種環(huán)燒紅,放冷。接一接種環(huán)的無菌水至載玻片上。
3. 將接種環(huán)燒紅,放冷。
4. 每組再分別以滅菌請(qǐng)放冷的接種環(huán)分別自長有金黃色葡萄球菌或大腸桿菌的
NA 平盤取少量的菌,將菌均勻的涂抹于含無菌水的玻片上。(抹片)
5. 以玻片夾夾住玻片,把玻片在酒精燈的火燄上來回?cái)?shù)次,以固定細(xì)菌。
6. 滴一至兩滴結(jié)晶紫溶液至含有細(xì)菌的玻片處,約 30 – 60 秒后倒棄結(jié)晶紫溶液至廢液回收燒杯中。
7. 以含蒸餾水的的洗滌瓶清洗玻片的背面至看不見結(jié)晶紫的顏色。
8. 以濾紙吸乾玻片。
9. 將蓋玻片蓋在含有細(xì)菌的載玻片的位置處。
10. 將載玻片放置顯微鏡上,以 40 X 或 100 X 的接物鏡觀察菌的型態(tài)與大小