了解癒合組織的形成和培養(yǎng)基配置及植物再分化過程
信息分類：生命科學(xué)資訊 作者:YIYI發(fā)布
胡蘿蔔組織培養(yǎng)
一、實驗?zāi)康?/div>
學(xué)習(xí)組織培養(yǎng)方法，了解癒合組織的形成和培養(yǎng)基配置及植物再分化過程。
二、實驗原理
處理分生組織較旺盛的細胞，形成癒傷組織（callus）再由癒傷組織分化為根、芽等植物各部，繼續(xù)培養(yǎng)成完整植株。以植物組織為培植體，在適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基上誘發(fā)不定芽，發(fā)芽可長出自培植體所生之癒合組織；或?qū)K合組織與原培植體分離增殖，移植至適當(dāng)培養(yǎng)基上誘發(fā)不定芽，可使繁殖速率增高。
培養(yǎng)基成分上常用之生長素為IAA、IBA、NAA、2,4-D，生長素有促進不定根及抑制不定芽發(fā)生作用，在誘發(fā)不定芽形成時常須要降低生長素濃度，以期避免根之形成而無不定芽。另一個植物激素為細胞分裂素，常用者有萎黃素（Kinetin）、玉米素（Zeatin）、苯甲腺漂呤（Benzyladenine）等，它具有促進不定芽發(fā)生之效果，對發(fā)根有抑制作用。在培養(yǎng)時與生長素有互相影響，一般以細胞分裂素之濃度較高時，有不定芽發(fā)生，當(dāng)兩種混合使用，也可促進不定芽發(fā)生之效果。
三、實驗方法
1.將所有器皿洗淨(jìng)
2.配置培養(yǎng)基，分裝入組織培養(yǎng)瓶中，于Autoclave高溫滅菌40分鐘，取出后待其凝固使用。（需另外準(zhǔn)備無菌水）
3.以下部分在無菌是中操作，取胡蘿蔔根用中性洗劑洗滌浸入2~1.5%次氯酸鈉溶液30分鐘后，移入無菌水中浸洗數(shù)次，用消毒過刀片切下5mm厚的組織片，以切口處平貼在培養(yǎng)基上。置于恒溫箱中40~60天（溫度25℃）
4.癒合組織再分化—以胡蘿蔔根的形成層進行逆分化實驗，再由癒合組織進行再分化條件，使其分化為跟或芽。
本文由出自上海光學(xué)儀器廠，轉(zhuǎn)載請注明
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