螢光抗酸菌染色：螢光染色法用在顯微鏡鏡檢時容易觀察且敏感度較好，
因為螢光染色的抹片一般于250倍至450倍顯微鏡下鏡檢，而復(fù)紅染色的抹片則于800倍至1000倍鏡檢。
由于顯微鏡使用的倍數(shù)不同，鏡檢時，相同時間內(nèi)螢光鏡檢染色抹片的視野較複紅染色抹片廣(約4-10倍)，所以螢光染色敏感度較好，此外螢光染色法將抗酸菌于黑色或暗紅色背景下染成具黃色光的菌體，而複紅染色將抗酸菌于藍色背景下染成紅色菌體，顯然螢光染色法較易于觀察。螢光染色的抹片應(yīng)于24小時內(nèi)鏡檢，否則螢光可能會消失。雖然將經(jīng)染色的抹片于5℃隔夜保存可減少螢光的消失，但是最好能于24小時內(nèi)完成鏡檢時才染色抹片。
抹片染色步驟如下－

(a)         將已制備完成抹片置于染色架上。

(b)       加入螢光染劑(auramine O或auramine O-rodamine B-phenol)，覆蓋整個抹片，靜置15分鐘。(不必加濾紙片，不必加熱)。

(c)        以蒸餾水或去離子水沖洗(所用的水不可含氯，因為氯會干擾螢光的結(jié)核菌產(chǎn)生)。

(d)       加入酸性酒精覆蓋整個抹片脫色約兩分鐘。

(e)        以水沖洗抹片后吸乾。

(f)         加入複染溶液(高錳酸鉀溶液或acridine orange 溶液)，覆蓋整個抹片複染約兩分鐘。時間不能過長，否則螢光會消失。

(g)        以水沖洗抹片后吸乾，置于空氣中乾燥。

(h)        迅速以螢光顯微鏡鏡檢。Auramine O染色結(jié)核菌為金黃色。Auramine O-rodamine B-phenol染色結(jié)核菌為橘紅色。高錳酸鉀溶液複染背景為黑色，acridine orange溶液複染背景成暗橘色。