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怎樣用電子顯微鏡觀察三個(gè)單株抗體?

信息分類(lèi):生命科學(xué)資訊    作者:YIYI發(fā)布 

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     病毒的致病原因和感染途徑則是刻不容緩。第一個(gè)步驟便是將病毒附著于細(xì)胞上,使病毒與細(xì)胞上的接受子結(jié)合。病毒與細(xì)胞上的接受子具有專(zhuān)一性,也就是說(shuō),若某一病毒可感染某組織,則此組織必定有專(zhuān)一于此病毒的接受子。
     為了解病毒的致病原因,分析接受子的特性即為一個(gè)很重要的課題。本篇報(bào)告中研究出三個(gè)單株抗體(MAbs)M45、G35及Q3,因MAbs與虹鱒生殖細(xì)胞結(jié)合,所以可保護(hù)RTG-2不受VHSV的感染,但這種保護(hù)功能僅限作用于鮭形目所建立的細(xì)胞株,說(shuō)明Mabs與細(xì)胞的結(jié)合具有種的專(zhuān)一性。令人意外的是,發(fā)現(xiàn)Mabs與RTG-2的receptor結(jié)合,除了可保護(hù)RTG-2不受VHSV的感染外,亦可保護(hù)RTG-2不受其他Rhabdoviridae的魚(yú)類(lèi)病毒感染。
     利用免疫螢光及免疫電子顯微鏡觀察后,證實(shí)三個(gè)單株抗體M45、G35及Q3在細(xì)胞與病毒結(jié)合之前,皆先與細(xì)胞膜結(jié)合以達(dá)到保護(hù)細(xì)胞的作用,且經(jīng)由免疫沉淀的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)receptor是由兩個(gè)大小分別為200 kDa和44 kDa的蛋白質(zhì)組成的複合物,此複合物經(jīng)生化分析后得知其中一部份包含纖維黏蛋白質(zhì)(fibronectin),且此部份是Rhabdoviridae病毒對(duì)細(xì)胞最主要的receptor。取200 kDa的蛋白質(zhì)製作抗體,另外并以Escherichia coli表現(xiàn)虹鱒的纖維黏蛋白質(zhì),發(fā)現(xiàn)此抗體會(huì)與此表現(xiàn)蛋白結(jié)合。而純化的虹鱒纖維黏蛋白質(zhì)亦具有與VHSV結(jié)合的能力。 Rhabdoviridae此科病毒對(duì)低等嵴椎動(dòng)物感染途徑的研究上,是最先明確證實(shí)細(xì)胞膜成分是病毒感染細(xì)胞主要的receptor。
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