問下倒置生物顯微鏡如何辨別壞死細胞呢？

上海光學儀器廠回復：
細胞壞死與細胞凋亡：細胞死亡可分細胞壞死和細胞凋亡兩種，其作用機制如下

〈1〉細胞凋亡〈apoptisis〉：多細胞生物再胚胎發(fā)展過程、免疫調(diào)節(jié)及維持體內(nèi)環(huán)境恆定中，必須藉由引發(fā)自殺的

機制來移除多馀或功能不全的細胞。這種機制因為受到遺傳基因的控制，故又稱程式性死亡〈programmed cell

death〉。惡劣的環(huán)境如過冷或是過熱、紫外線，缺氧或化學藥物等都可能使細胞傷害，啟動程式引發(fā)凋亡，可以

保護生物個體，避免細胞脫離控制，造成突長。細胞凋亡一旦發(fā)生，將會造成細胞核消失、DNA片段化、最后細

胞分解成許多具有完整細胞膜的凋亡小體〈cell bodies〉。由于細胞膜仍完整，因此其內(nèi)所含有的細胞分解后有毒

物質(zhì)并不會釋放，因此可避免週遭組織的發(fā)炎和傷害。這些凋亡小體很快會被週遭的吞噬細胞〈phagocytes〉或其

他細胞吸收。

〈2〉細胞壞死〈necrosis〉：通常是較嚴重的物理化學傷害所造成，主要是細胞通透性發(fā)生改變而膨脹或破裂，并

造成溶體〈lysosome 〉釋放出各種分解酵素和細胞激素〈cytokines〉等物質(zhì)，而使週遭組織受傷引起發(fā)炎反應(yīng)。

3. 水中污染物對人類細胞的影響：水中的污染物種類包含微生物，包括細菌、病毒、原生動物等；有機物，包

括各種揮發(fā)性有機物、合成有機物、消毒副產(chǎn)物、清潔劑、農(nóng)藥等；無機物，包括各種重金屬、鹽類、氯、溶解

性固體物等。這些污染物對于人體的影響甚鉅，故藉由觀察細胞經(jīng)污水處理后的改變，則可了解這些污染物對于

人類細胞的影響。
三. 材料

1. 細胞株：人類子宮頸癌細胞〈HeLa cell〉

2. 試劑：錐藍-用于染細胞

              Saponin-介面活性劑，可將細胞膜均勻打洞，使膜結(jié)構(gòu)鬆散

              H2O2-可引起程式性死亡

             NaCl-配置生理食鹽水，0.9% NaCl為人的等張溶液

3. 待測樣本：外雙溪溪水

4. 器材：載玻片、蓋玻片、微量吸管、光學顯微鏡

1.細胞鮮活良好時：在倒置生物顯微鏡下，可以看到細胞透亮，呈自然伸展狀態(tài)。狀態(tài)不好時，細胞部分伸展，或飄浮，壞死的細胞有點發(fā)黑并飄浮。

2.懸浮細胞主要是根據(jù)細胞的透亮程度，狀態(tài)良好時，細胞透亮，狀態(tài)不好時，可見細胞有顆粒狀，發(fā)黑。

3.取部分細胞用4％的臺盼蘭染色，活細胞不著色，死細胞著色