制備生物大分子的程序以及制備注意事項
制備生物大分子的唯一目的就是為了對其進行研究而做的事先準備工作。
下面是制備生物大分子的操作程序:
(1).先進行所需生物材料的選擇并進行預處理工作。
(2).將所備生物材料的組織細胞進行破碎處理。
(3).進行抽提工作(加以適當?shù)木彌_液,針對蛋白質一般都是使用低鹽
溶液)
(4).進行分離、純化(一般使用沉淀法、離心法、層析法等)。
(5).進行純度的分析鑒定。
(6).進行產物的濃縮和干燥。
制備生物大分子時必須要注意一些問題:選擇好更方面和靈敏的分析方法,
能夠起到進行到每一步時都能估算出它的提純程度;選擇合適的含有生物大
分子較多的實驗材料;因為提純工作相對較復雜,盡量在這個過程中減少提
純步驟;注意避免生物大分子的變性,這就要做到適當?shù)乃釅A度、不要進行
較強碰撞、盡量避免產生大量氣泡;為防止蛋白質的水解作用加入蛋白酶抑
制劑就能避免。