繼發(fā)現(xiàn)水母GFP之后,在其他物種中也發(fā)現(xiàn)了幾個類似的發(fā)射光光譜為綠色區(qū)域
的FP (Matz et al. 1999).這些物種包括礁珊瑚、�?�、撓腳類動物(Masuda et al.
2006)和文呂魚(Deheyn et al. 2007)。雖然天然GFP具有明亮的熒光和良好的耐光
性,但其雙峰激發(fā)光譜(395nm)最高峰值處在紫外范圍邊界。而且,紫外光需要特殊
的顯微鏡光學裝置,并在成像過程中損傷細胞。在早期的GFP基因突變研究中,Tsien
和同事發(fā)現(xiàn)了一個.單突變(S65T) (Heim et al. 1995)可以消除395nm的峰值,并把
最大的激發(fā)光波長轉(zhuǎn)移到488nm。這種突變是GFP最普遍的一種變體,EGFP是目前
用得最多的GFP.同時,EGFP可使用常用的異硫佩酸熒光素(FITC)濾光
片進行成像,EGFP是目前GFP變休中亮度最大和光穩(wěn)定性最好的GFP。這些特點使
得EGFP成為最受歡迎的FP和單標記熒光標記實驗最好的選擇。EGFP唯一的缺點是
弱pH敏感性和輕微二聚化趨勢。