種微生物的復(fù)雜集合體研究用電子
顯微鏡(SEM)
盡管在細(xì)胞成像中熒光顯微技術(shù)發(fā)揮著重要的作用,然而
熒光顯微鏡的分辨率仍然
低于電子顯微鏡(EM)�?墒�,掃描電子顯微鏡(SEM)研究顯示,植物表面的生物
膜是嵌在有機物質(zhì)上的多種異種微生物的復(fù)雜集合體。對于研究者而言.令人失
望的是電子顯微鏡下的植物上的絕大部分細(xì)菌細(xì)胞仍然是未知的。
幸運的是,免疫電鏡的膠體金標(biāo)記技術(shù)為自然環(huán)境,卜特定微生物的檢測和拐示微生
物細(xì)胞更為復(fù)雜的生物學(xué)現(xiàn)象提供了新的研究手段。膠體金標(biāo)記技術(shù)的優(yōu)點在于將分子
原位定位的高特異性與掃描電鏡的高分辨率結(jié)合起來,故在植物病理學(xué)研究中得到了廣
泛的應(yīng)用。例如.在Erwinia amylovora和Psewlonurnas syringue與植物細(xì)胞的相互作用過
程中。研究者設(shè)計了精妙的電鏡實驗,提出了Hrp纖毛與m型分泌效應(yīng)蛋白的作用模
型。這些研究涉及利用不同尺寸的金顆粒進行單標(biāo)記和雙標(biāo)記來檢測兩種蛋白,并川透
射電鏡來進行觀察。將特異性杭Salmonella。~Thompson血清型的細(xì)胞與鞭毛
的單克隆抗體用金進行標(biāo)記,結(jié)合使用掃描電子顯微鏡,在將該細(xì)菌接種于芫婪葉上之
后,研究者能得到Salmonella enierica Thompson血清型的高分辨率的顯微成像。更重要
的是,對鞭毛組分進行免疫檢測使研究者能觀察到沙門菌Thompson血清型的鞭毛是錨
定在葉面上,這表明鞭毛的作用是使細(xì)胞鉆附于植物(圖26.9)ta,1o除了免疫細(xì)胞化
學(xué)外,研究者根鋸凝集素、酶和蛋白質(zhì)等對特定分子結(jié)合的特異性開發(fā)了很多其他的細(xì)
胞化學(xué)研究方法來用于電子顯微鏡的金標(biāo)記。關(guān)于利J月金標(biāo)記和電子顯微鏡技術(shù)研究植
物一徽生物的相互作用的方法的討論與描述.