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觀察表皮細胞的形狀及氣孔的構(gòu)造-植物學顯微鏡

信息分類：生命科學資訊　　　　作者:YIYI發(fā)布　

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觀察表皮細胞的形狀及氣孔的構(gòu)造-植物學顯微鏡


目的:觀察表皮細胞的形狀及氣孔的構(gòu)造

方法與步驟:

1。取樣采新鮮無病的成熟的小皮葉片，剪取中上部，分割成2-3cm的組織塊。
2.固定以FAA固定24小時，并保存其中。

3.刮去上表皮和葉肉將已固定的葉片轉(zhuǎn)移至清水中清洗數(shù)次并浸泡以除去固定液。
再將材料放于小紙片上，用保安刀新刀片(刀刃垂直葉面)輕輕、均勻地刮去上表皮和一些
葉肉，這才便于酶液徹底解離葉肉細胞，僅留下表皮組織。

4.酶解將留存的表皮轉(zhuǎn)移置1一4%混合酶液(果膠酶加纖維素酶各半)中，保持
在25---30℃恒溫系件下處理(解離)半小時，待葉肉完全解離后，再將表皮移至培養(yǎng)皿(成
表面皿)中用蒸餾水進行洗刷(此時可借助兩支描筆清除葉肉)，換一次蒸餾水轉(zhuǎn)入表面
皿鏡檢(適合的材料才制片)。
    5。染色(海氏蘇木精染色法)一媒染用4%鐵礬染5-10分鐘。
    6.水洗自來水漂洗10分鐘，蒸餾水過一遍。
    7.染色0.5%蘇木精染3一5分鐘。
    8。水洗自來水洗約半分鐘。
    9.分色2%鐵礬分色(約3-4分鐘)適度(核、壁呈藍褐色，其他部為淺藍灰
色)。
    10.水洗自來水漂洗10分鐘(在培養(yǎng)皿中進行，再經(jīng)蒸餾水過一遍。
    11.修整表皮在培養(yǎng)皿中以描筆將表皮刷平，然后用紙從水中撈取表皮，仍用描筆
使材料平展，再用眼科小剪刀剪成正方形(3 x 3mm)，不要主脈部分，將小塊材料《帶
紙的)放入盛水的培養(yǎng)皿中使表皮與紙片分離，并鑷出紙片，最后用描筆移至表皿中，立
即蓋上鏡頭紙轉(zhuǎn)入下步。
    12.脫水與透明將上項蓋有鏡頭紙的表面皿中的材料進行脫水，脫水劑與透明劑都
摘注在紙上，使其慢慢浸透材料。各級酒精脫水時間為3一5分鐘，無水灑精為二次，透
明時，二甲苯也為兩次(每次2分鐘)。二甲苯與脫水劑都不可太多，以免材料漂浮以致
卷曲。
    在脫水、透明工作完成后，將帶有二甲苯的材料一片片輕輕地從表面皿邊緣移至載玻
片上，決不能一次揭開鏡頭紙及銀出材料。當材料轉(zhuǎn)至載片中央部位后，隨即滴樹膠封
藏。

本文由出自上海光學儀器廠，轉(zhuǎn)載請注明
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