相差
顯微鏡可以觀察更清晰細(xì)胞中折射率相差結(jié)構(gòu)
相差顯微鏡具有與普通
光學(xué)顯微鏡相同的分辨本領(lǐng),但是對于活
細(xì)胞中折射率相差不多的那些不同的結(jié)構(gòu),這種顯微鏡可以利用折射
率的這種微小差異而改進(jìn)對那些結(jié)構(gòu)的可見度,從而使我們看得更加
清楚。相差顯微鏡之所以能夠做到這點(diǎn),是因?yàn)樵诰酃馄魃涎b有特殊
的光闌,在物鏡上裝有位相板。相差顯微鏡聚光鏡上的環(huán)形光闌,使
光線呈中空的錐形通過聚光器,其余的光都被吸收掉了。這種錐形光
線聚焦在樣品上。
在物鏡的后焦面處放置一塊位相板。這是一塊圓形玻璃板,上面
有一圓槽(或凸起)。當(dāng)沒有觀察樣品時(shí),位相板圓槽的大小和形狀
正好與環(huán)形光闌在后焦面上的直接象相吻合。如果在聚光鏡和物鏡間
放上樣品,此時(shí)在后焦面上除了光闌的直接象之外,還有許多重疊的
衍射象。位相板上的槽或凸起的深度要符合一定要求,當(dāng)直接象的光
線和衍射象的光線通過位相板時(shí),應(yīng)使兩組光線的光程相差四分之一
波長。在這種條件下,眼睛所看不見的位相差就轉(zhuǎn)變?yōu)槟軌蚩吹靡姷?/div>
強(qiáng)度差了。
兩組光線的波幅相加,使看到的物體象比背景亮,這就是亮對比
相笨顯微鏡。
兩組光線的波幅如果部分地抵銷,可使看到的物體象比背景暗,
這就是暗對比相差顯微鏡。
相差顯微鏡(無論是亮對比還是暗對比)將折光率的微小差別給
擴(kuò)大了,這就使我們能夠區(qū)分互相靠得很近的結(jié)構(gòu),并對以前看不到
的那些結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀察。
對細(xì)胞在有絲分裂或減數(shù)分裂期間染色體的行為,也可比較容易
地進(jìn)行追蹤了。其它一些細(xì)胞器也可以用相差顯微鏡進(jìn)行觀察。相差
顯微鏡的研究令人信服地證明,以前用固定和染色法所確定的那些細(xì)
胞器,是真實(shí)存在的結(jié)構(gòu),而不是人工造成的假象。然而,這種顯微
鏡所觀察到的物象,其周圍有一圈暈環(huán),,并且折射率不同的兩區(qū)域
間的光強(qiáng)度差別離開二者的界面越遠(yuǎn)則越小,這些情況都會造成一定
程度的失真。
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