染色原理
骨髓小粒中的含鐵血黃素稱細(xì)胞外鐵,其中的三價鐵與蛋白分子結(jié)合不牢,
經(jīng)稀鹽酸處理后而游離,并能在酸性亞鐵氰化鉀中產(chǎn)生普魯士藍(lán)
(Prussian blue)反應(yīng),細(xì)胞內(nèi)鐵也能產(chǎn)生此反應(yīng)。
染色方法
骨髓涂片應(yīng)用甲醇固定10分鐘。將20%亞鐵氰化鉀酸性溶液滴
加到有較多骨髓小粒的骨髓涂片上作用45分鐘,
然后自來水沖洗。核固紅溶液復(fù)染10-30分鐘,水洗、晾干、顯微鏡鏡檢。
骨髓細(xì)胞外鐵的判定
(1)方法:用低倍鏡于骨髓小粒處尋找藍(lán)色顆粒,然后在油鏡下檢查。
細(xì)胞外鐵含量多少可分級判定。
(2)分級:
0:骨髓小粒處無藍(lán)色鐵顆粒
+:有少量藍(lán)色鐵顆粒
++有較多藍(lán)色鐵顆粒及小珠
+++:有許多鐵粒、小珠和少量藍(lán)色小塊
++++:有極多鐵粒、小珠和較多藍(lán)色小塊且密集成堆。
2.骨髓細(xì)胞內(nèi)鐵的判定
(1)方法:細(xì)胞內(nèi)鐵主要見于合成血紅蛋白階段的幼紅細(xì)胞,
藍(lán)色顆粒定位于胞質(zhì)中,在顯微鏡油鏡下計數(shù)100個中幼紅與晚幼紅細(xì)胞,
計算出鐵粒幼紅細(xì)胞的百分率。細(xì)胞內(nèi)鐵含量多少可分級判定。
(2)分級:
0:無鐵顆粒;
I型:1~3個鐵粒; II型:4~6個鐵粒; III型:7一9個鐵粒;
IV型:10個及10個以上鐵粒。
(3)環(huán)形鐵粒幼紅細(xì)胞:由于鐵顆粒分布在線粒體中,有核紅細(xì)胞胞質(zhì)中
有環(huán)繞核規(guī)則排列6粒以上且繞核1/2以上稱環(huán)形鐵粒幼紅細(xì)胞。