以轉(zhuǎn)殖基因之酵母菌PL3進行雌性激素對其生長的影響,所需時間須2天左右,相當(dāng)簡便且靈敏,
對于一般實驗室不須增添新的昂貴儀器,新手容易操作與管理,且轉(zhuǎn)殖的酵母菌可永久保存,
相對于人類之轉(zhuǎn)殖細胞如MCF-7來的穩(wěn)定。但是酵母菌細胞多了細胞壁作為屏障,
且其品系與人類相距太遠,導(dǎo)致試驗所得結(jié)論,需經(jīng)多方驗證后才可逕行推論。
以分光光度計波長600 nm分析,可推估酵母菌細胞數(shù),其培養(yǎng)液在此波長干擾不大。
以
顯微鏡觀察計數(shù),亦可推估酵母菌細胞數(shù),但是濃度過高需經(jīng)稀釋,費時較長
,應(yīng)考慮酵母菌每隔90分鐘即可增生一倍。
每次進行試驗前,酵母菌液不得超過24小時,以免過于老化。試驗進行應(yīng)以24小時即可進行觀察分析,
太早細胞仍處于生長遲滯期,太晚細胞老化,生長過密,不易計數(shù)。
細胞初始個數(shù)會影響96孔盤的觀察,濃度過高造成細胞沉降凝集,因而高估細胞數(shù)。
本次試驗以乙基雌二醇做測試,50 ppn即可促進酵母菌PL3增生,反應(yīng)相當(dāng)靈敏。