骨骼切片染色的一些小常識(shí)-生物學(xué)研究
顯微鏡
一般之大塊骨組織或鈣化組織之脫鈣,最常使用酸性溶液,碳于
骨骼內(nèi)以碳酸研或磷酸鹽之型態(tài)存在,其于水溶中之溶解度極小
,酸會(huì)由離子交換而使其形成可溶性之鹽。
1、組織的選擇與決定,進(jìn)而決定固定液與脫鈣方法。
2、固定后以流水沖洗干凈,勿留固定液于組織內(nèi)
3、脫鈣;
將組織懸掛于脫鈣液中之上部,脫鈣液之體積應(yīng)為組織體積的,
100倍因骨內(nèi)之礦物質(zhì)成分會(huì)中和液中之酸。醇性溶液會(huì)使組織
膨大,惟脫鈣無法完全。 0.5 N 鹽酸于70 %~80 %之醇類脫鈣須
時(shí)8天。于40 %內(nèi)須時(shí)4天。如在水中只須二天。
甲酸5 %水溶液可于3 ~5天脫鈣,但于30 %醇類須時(shí)四個(gè)月。于
80 %之醇類中即不能脫鈣。因醇會(huì)抑制離子化而減慢離子交換。
若須快速脫鈣,則配合Phloroglucin后可加重鹽酸或硝酸之含量,
Phloroglucin可防止骨內(nèi)有機(jī)成分受破壞。 40 %硝酸可與
Phloroglucin同時(shí)并用