菌根菌形態(tài)特征與實(shí)生苗根部觀察
實(shí)生苗以介質(zhì)接種法形成菌根后,
透過 3種不同顯微鏡觀察根部與菌根菌形態(tài)特征,并以對(duì)照組處理之實(shí)生苗作為比對(duì)之參考。
立體顯微鏡觀察流程系將從試管中取出接種過的試驗(yàn)組與對(duì)照組幼苗,以二次蒸餾
水沖洗根段表面沾覆的介質(zhì),
再置于顯微鏡下進(jìn)行觀察及拍照紀(jì)錄。以
光學(xué)顯微鏡觀察菌絲樣本,系將收集之菌絲置于載玻片上,
滴入數(shù)滴蒸餾水后,蓋上蓋玻片以 顯微鏡進(jìn)行觀察及拍照紀(jì)錄
掃描式電子顯微鏡樣本之制作
,選取菌根樣本,切取長(zhǎng) 1 mm 之根段,放置于 2.5%戊二醛(glutaraldehyde)固定液中 3 h,
續(xù)以0.1 M 磷酸緩衝溶液(pH 7)清洗,再以 1%四氧化鋨(OsO4)固定 1 h。
接著進(jìn)行系列不同濃度乙醇之脫水處理,再以 100 %乙醇及 100 %丙酮脫水 6 次。
以臨界點(diǎn)乾燥機(jī) (HitachiHCP-2 Critical Point Dryer)進(jìn)行乾燥和真空鍍金機(jī)(Pelco SC-6 Sputter Coater)鍍金后,
以掃描式電子顯微鏡觀察其細(xì)微構(gòu)造,并照相紀(jì)錄
經(jīng)掃描式電子顯微鏡觀察,在接種苗根部外側(cè)交織之松茸菌落中,有密集附著如網(wǎng)狀的菌絲披覆在根段表面
宿主的選擇是采用過去未曾接受過試驗(yàn)的濕地松樹種,經(jīng)接種后透過肉眼辨識(shí)與顯微鏡的輔助,
觀察到的形態(tài)特征與前人所描述者均相類似
例如:宿主生長(zhǎng)量的增加、根尖形成叉狀菌根、根部皮層細(xì)胞的細(xì)胞間隙間出現(xiàn)菌絲以及偶見氣生菌絲的形成等,都