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以螢光顯微鏡觀察魚類18小時的胚胎

信息分類：生命科學(xué)資訊　　　　作者:YIYI發(fā)布　

以螢光顯微鏡觀察魚類18小時的胚胎

探討藉由電穿孔處理精子，使精子攜帶有以CMV (Cytomegalovirus) 立即初期基因 (immediate early gene)

啟動子(promoter) 驅(qū)動的外源性加強型綠螢光蛋白基因 (enhanced green fluorescent protein, EGFP)，

再藉由人工受精的方式，將此基因?qū)胨拈g魚(Barbus tetrazona) 的卵中，以期在受精卵中表現(xiàn)轉(zhuǎn)殖基因，

進而得到基因轉(zhuǎn)殖四間魚。實驗共得受精卵120 個。受精率68﹪、孵化率88﹪，此與未經(jīng)處理的控制組相比，

受精率有顯著的差別，但在孵化率上差別并不顯著。

以聚合酶連鎖反應(yīng) (polymerase chain reaction, PCR) 的方法偵測18顆受精后10小時的受精卵，

15顆呈正反應(yīng)。以螢光顯微鏡觀察受精后18小時的胚胎，全身呈螢光反應(yīng)。

證明以電穿孔法促使四間魚的精子作為傳遞外源性異質(zhì)基因的媒介是可行的。

關(guān)鍵字：電穿孔、加強型綠螢光蛋白基因、四間魚、轉(zhuǎn)殖、精子媒介。

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