揮發(fā)性有機(jī)氣體之檢測(cè)分析方法及原理

吹氣捕捉裝置(Purge and Trap Technique)搭配氣相層析儀是一種相當(dāng)普遍的分析溶于水中VOCs的方法，再搭配上火焰離子偵檢器（Flame Ionization Detector; FID）或者是電子捕獲偵檢器（Electron Capture Detector; ECD），則可組成價(jià)廉又簡(jiǎn)易的分析系統(tǒng)。利用FID的堅(jiān)固耐用、高靈敏度以及極大的線性范圍等優(yōu)點(diǎn)，我們可以分析水樣中有毒的含碳?xì)涞幕�合物（如Benzene、Toluene、 Ethylbenzene、Xylenes；BTEX）；而利用ECD的高靈敏度，可監(jiān)測(cè)水樣中含鹵碳的有機(jī)物(Halogenated compounds)，甚至是使用質(zhì)譜儀偵檢器（Mass Spectrometer；MS），更可即時(shí)對(duì)于VOCs進(jìn)行定性的工作，見(jiàn)圖(一)。

本實(shí)驗(yàn)選擇三氯乙烯及四氯乙烯作為研究毒性之目標(biāo)待分析物，因其在工業(yè)界的用途極廣，作業(yè)人員之曝露風(fēng)險(xiǎn)較高。由于揮發(fā)性有機(jī)氣體之溶解度直接影響其毒性，因此選擇利用吹氣捕捉法帶出經(jīng)氣相暴露后之細(xì)胞培養(yǎng)液中的揮發(fā)性有機(jī)氣體，并利用氣相層析儀測(cè)定其中三氯乙烯及四氯乙烯之濃度。

實(shí)驗(yàn)大致步驟為: 將細(xì)胞經(jīng)氣相暴露法處理后，收集細(xì)胞培養(yǎng)液以二次水稀釋200-2000倍后，保存于4 0C；測(cè)定時(shí)取10毫升稀釋液至于一圓形玻璃瓶中，并以針頭將氦氣導(dǎo)入稀釋液中5分鐘(20 mL/min)，被氦氣吹出之揮發(fā)性有機(jī)氣體隨即以化學(xué)吸附劑吸收后，再利用熱脫附法將其脫附于毛細(xì)管柱中，并以電子捕捉偵測(cè)器的進(jìn)行分離及偵測(cè)。此方法對(duì)三氯乙烯與四氯乙烯的偵測(cè)極限為數(shù) g/L。 圖(二)為利用此設(shè)備對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)液與試劑水分析結(jié)果之比較，圖(三)為以三氯乙烯為例之撿量線。

揮發(fā)性有機(jī)氣體之體外細(xì)胞毒性分析方法：

由于揮發(fā)性有機(jī)氣體以氣態(tài)被吸入肺部肺泡后，須溶入肺泡表層液相，方可被肺泡吸收，進(jìn)入肺部。因此本計(jì)畫(huà)發(fā)展模擬揮發(fā)性有機(jī)氣體被肺部肺泡吸收的方式，以氣相暴露法測(cè)試揮發(fā)性有機(jī)氣體之細(xì)胞毒性；其實(shí)驗(yàn)步驟如下：

先將一直徑22mm的小玻璃皿，以凡士林黏于60mm細(xì)胞培養(yǎng)盤(pán)中間

              ˉ              將細(xì)胞 (2.5-50X10³/ml) 種植于60mm細(xì)胞培養(yǎng)盤(pán)內(nèi)

              ˉ              于CO₂培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時(shí)

加入不同體積三氯乙烯及四氯乙烯于中間22mm的小玻璃皿內(nèi)，使其自然揮發(fā)后，再溶入周圍培養(yǎng)細(xì)胞之培養(yǎng)液中。

三氯乙烯及四氯乙烯對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)之抑制作用

ˉ   培養(yǎng)之細(xì)胞經(jīng)上述方法分別處里三氯乙烯及四氯乙烯24小時(shí)

ˉ              吸去藥劑，以PBS洗兩次

              ˉ              加入胰蛋白脢(trypsin, 0.5 ml/plate), 將細(xì)胞自60mm培養(yǎng)盤(pán)取下

              ˉ              加入培養(yǎng)液2 ml稀釋

              ˉ              取適量細(xì)胞以細(xì)胞計(jì)數(shù)計(jì)算細(xì)胞數(shù)目或進(jìn)行細(xì)胞群落形成等試驗(yàn)