鼠耳組織疏螺旋體菌之分離培養(yǎng)與鏡檢
本研究將捕獲鼠類之耳組織于攜回實(shí)驗(yàn)室后,分批進(jìn)行疏螺旋體
菌之分離培養(yǎng)處理,并必須于采獲后 2 週內(nèi)完成疏螺旋體菌分離培養(yǎng)
工作,以確保鼠耳組織內(nèi)既有疏螺旋體菌之存活。鼠耳組織在進(jìn)行分
離培養(yǎng)之前,首先將兩翼之鼠耳組織于盛有 75% 乙醇溶液之小燒杯中
浸泡約一分鐘,以便將鼠耳體表之多數(shù)嗜氧性雜菌去除。隨后則以細(xì)
鑷子將鼠耳置于無菌紗布中,以吸乾沾附在鼠耳體表之多馀酒精溶
液,并使用過火殺菌后之組織剪將鼠耳組織剪成小塊多片之組織碎片
(大小約 3 mm × 3 mm),再將每一鼠耳翼組織碎片置入裝有 2 ml 螺
旋體培養(yǎng)基(BSK-H medium, Sigma Co., U. S. A.)及 6 %無菌兔血
清(Rabbit serum)之無菌培養(yǎng)試管(Sarstedt, Germany)中(7,38),
并置于二氧化碳細(xì)胞培養(yǎng)箱(Nuaire, U. S. A.)內(nèi),在 35℃之培養(yǎng)
溫度及 5%之二氧化碳濃度條件下進(jìn)行鼠類鼠耳組織疏螺旋體菌之分
離培養(yǎng)試驗(yàn)。培養(yǎng)后每週抽取 10 μl 之螺旋體培養(yǎng)液,以高倍放大倍
率(400X)之暗視野
顯微鏡進(jìn)行鏡檢觀察乙次,連續(xù)觀察八至十週,
并記錄疏螺旋體菌之陽性培養(yǎng)結(jié)果及培養(yǎng)所需天數(shù),以做為研究螺旋
體菌分離培養(yǎng)之實(shí)驗(yàn)參考數(shù)據(jù)