簡單染色法實(shí)驗(yàn)詳細(xì)實(shí)驗(yàn)步驟!
金相顯微鏡專業(yè)廠家!
1. 玻片的準(zhǔn)備:做細(xì)菌抹片的玻片必須乾淨(jìng),首先要除去玻片上的油脂。處理的方法,
可用肥皂和清水擦洗或?qū)⒉F苯釉诨馃鹕线^火2~3次。
2. 抹片的制備:避免制作出太厚和太密的抹片是做好抹片的首要條件。一個好的抹片必
須是乾燥后,形成一白霧狀的均勻薄層。抹片制作時,細(xì)菌是培養(yǎng)在液態(tài)培養(yǎng)基
(liquid medium)或固態(tài)培養(yǎng)基(solid medium)中,有不同的操作方法。
(1) 液態(tài)培養(yǎng)基:以無菌操作方法,用接種環(huán)挑取懸浮菌液至玻片抹開,成為約1公分圓環(huán)。
(2) 固態(tài)培養(yǎng)基:先挑一滴無菌水在玻片的中央,再用接種環(huán)從固態(tài)培養(yǎng)基挑取一點(diǎn)點(diǎn)的
菌,在含有一滴水的位置,由中央往外輕而均勻的抹開。
3. 加熱固定:除非將抹片固定,否則在染色的過程中,細(xì)菌將會被沖洗掉。加熱固定的
方法為將玻片直接快速在火燄上過火2~3分鐘等待液體蒸發(fā)即可(切勿火烤過久,以免破壞菌體原本結(jié)構(gòu))。
4. 置1~2滴染劑于抹片處,靜置適當(dāng)時間,約1~3分鐘。
5. 開啟水龍頭的自來水沖洗掉抹片上多馀的染劑(由玻片上緣輕輕沖洗至無色即可)。
6. 乾燥(室溫下自行風(fēng)乾或在火燄上過火乾燥)。
7. 鏡檢,在抹片處滴上香杉油,再利用物鏡100x的油鏡(oil immersion)觀察。
8. 觀察完畢,請用二甲苯將100x物鏡擦拭乾淨(jìng)。