責(zé)任編輯：顧怡婷   時(shí)間：2011-2-14  來(lái)源：上海光學(xué)儀器廠
用CCD拍攝顯微鏡圖片步驟：
 圖片色彩
 選擇圖片參數(shù)
 調(diào)整亮度

一、圖片色彩
正確的圖片色彩應(yīng)該真實(shí)的反映顯微鏡下影像的色彩.數(shù)碼相機(jī)具有色彩調(diào)整能力, 如果調(diào)不正確,會(huì)導(dǎo)致很大的色彩偏差.
影響圖片真實(shí)色彩的原因：
○顯微鏡光源偏色.
色彩偏差常來(lái)自于顯微鏡濾光片使用的錯(cuò)誤.例如普通照明時(shí)在光路中插入了熒光觀察使用的濾光片.
○相機(jī)白平衡設(shè)置錯(cuò)誤.如果是普通的照片, 白平衡設(shè)置錯(cuò)誤導(dǎo)致的色彩偏差并不明顯. 但在需要進(jìn)行光度分析的情況下,這種色 彩偏差對(duì)測(cè)量數(shù)據(jù)的影響就相當(dāng)大了.
      解決辦法：調(diào)整CCD相機(jī)的白平衡
                調(diào)整CCD相機(jī)的白平衡
正確調(diào)整相機(jī)的白平衡設(shè)置. 專(zhuān)業(yè)CCD相機(jī)上有手動(dòng)白平衡調(diào)整.
不明顯的偏色對(duì)測(cè)量影響更大
由于人眼的視覺(jué)錯(cuò)覺(jué),不易感覺(jué)到不太嚴(yán) 重的色偏.用對(duì)比的方式能觀察到照片的 細(xì)微色偏.
人眼對(duì)微小的色彩偏差不敏感

○目鏡上觀察到明顯的色偏
原因一般是濾光片出問(wèn)題. 在普通光照明的情況下,光源光路上必須 加LBD藍(lán)色濾光片,否則圖像色彩是黃色的. 作過(guò)熒光觀察后,如果使用的濾光片未撒 出,在普通光照明下,圖像色彩會(huì)是紅色 或綠色.
二、電子圖片
設(shè)置象素:一百萬(wàn)左右象素即可.一般不需要更大.畫(huà)面尺寸在1000X1000左右. 保存TIFF格式的原始圖片,不要使用任何軟件對(duì)原始圖片作任何處理. 避免使用圖片處理軟件來(lái)修飾圖片. 可以對(duì)圖片進(jìn)行大小的剪裁,調(diào)整亮度對(duì)比度的一些操作.
三、照片亮度控制
普通的照片亮度沒(méi)有太嚴(yán)格的要求.  在一些特殊情況下,需要對(duì)照片亮度進(jìn)行細(xì)致的調(diào)控.
○背景要夠亮的明視場(chǎng)圖片
○易曝光過(guò)度的暗視場(chǎng)照片
○暗視場(chǎng)照片背景需要黑,這可以調(diào)整相機(jī)黑平衡來(lái)實(shí)現(xiàn).也可以通過(guò)調(diào)整圖片亮度和對(duì)比度來(lái)達(dá)到滿意的效果.
○拍攝暗視場(chǎng)熒光照片可以設(shè)置黑平衡,能清除背景雜散的熒光
○通過(guò)控制曝光時(shí)間來(lái)控制照片的亮度
曝光控制參數(shù)選擇
(1)圖像尺寸:1000 X 1000 左右
(2)曝光模式:手動(dòng)控制 相機(jī)感光度:ISO200或ISO400 曝光時(shí)間控制:白色背景位置的灰度值在 230左右. 在拍攝一批照片的時(shí)候,應(yīng)當(dāng)盡量應(yīng)用同 樣的顯微鏡設(shè)置與相機(jī)設(shè)置拍攝全部照片.

關(guān)于普通-數(shù)碼相機(jī)的使用
普通數(shù)碼相機(jī)的配置是應(yīng)用于日常生活的要求.其"傻瓜"式的自動(dòng)拍攝，是不適合拍攝色彩單一的顯微鏡照片的. 需要手動(dòng)控制曝光. 一定要關(guān)閉相機(jī)的自動(dòng)白平衡功能,可以把白平衡設(shè)置定 在"日光"檔位.或者關(guān)閉. 不管相機(jī)的像素值是多少,只能選擇1000X1000檔位大小的圖片.