顯微鏡百科 -星型膠質(zhì)細(xì)胞原代培養(yǎng)具體步驟
星型膠質(zhì)細(xì)胞原代培養(yǎng)具體步驟
信息分類(lèi)：技術(shù)應(yīng)用 日期: 2011-7-29 9:27:05
星型膠質(zhì)細(xì)胞原代培養(yǎng)具體步驟
1、消毒用酒精棉球擦就可以了,浸泡是不會(huì)減少污染幾率的！而且浸泡會(huì)對(duì)腦組織有破壞。
2、剝腦膜在解剖顯微鏡下用解剖鑷就可以了！
3、0.125% 胰蛋白酶，37℃震蕩消化10min后，用含10% FBS 的DMEM培養(yǎng)液終止消化后輕輕吹打完過(guò)濾就行，將濾液1000r/min離心5min，棄上清.用含10% FBS 的DMEM培養(yǎng)液重懸沉淀，用吹打管仔細(xì)吹打成均勻的細(xì)胞懸液！接種就行！
4、差速黏附去除成纖維細(xì)胞時(shí)間我們的經(jīng)驗(yàn)一般20分鐘，時(shí)間太長(zhǎng)膠質(zhì)也貼壁了！你可以自己摸索調(diào)整！
雙目體視顯微鏡
三目體視顯微鏡
長(zhǎng)臂萬(wàn)向體視顯微鏡
1、消毒用酒精棉球擦就可以了,浸泡是不會(huì)減少污染幾率的！而且浸泡會(huì)對(duì)腦組織有破壞。
2、剝腦膜在解剖顯微鏡下用解剖鑷就可以了！
3、0.125% 胰蛋白酶，37℃震蕩消化10min后，用含10% FBS 的DMEM培養(yǎng)液終止消化后輕輕吹打完過(guò)濾就行，將濾液1000r/min離心5min，棄上清.用含10% FBS 的DMEM培養(yǎng)液重懸沉淀，用吹打管仔細(xì)吹打成均勻的細(xì)胞懸液！接種就行！
4、差速黏附去除成纖維細(xì)胞時(shí)間我們的經(jīng)驗(yàn)一般20分鐘，時(shí)間太長(zhǎng)膠質(zhì)也貼壁了！你可以自己摸索調(diào)整！
雙目體視顯微鏡
三目體視顯微鏡
長(zhǎng)臂萬(wàn)向體視顯微鏡
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