（激光）共聚焦顯微鏡和全內(nèi)反射顯微鏡原理及應(yīng)用的區(qū)別？

1）首先要知道自發(fā)熒光因?yàn)槭裁炊鴣?lái)，是樣品本身帶來(lái)的，還是樣品外部的東西造成的。

2)如果無(wú)法避免，那么找一個(gè)光譜儀器，讀一邊樣品的光譜，看看激發(fā)光譜和發(fā)射光譜長(zhǎng)什么樣。

3）比如說(shuō)有些fixation agent自發(fā)熒光比較強(qiáng)。如果是外部的東西造成的，盡量改protocol。

4)然后染色時(shí)盡量避免使用和自發(fā)熒光發(fā)射光譜重合的染料。比如說(shuō)，如果發(fā)射光譜的高峰在520nm段，最好不要用GFP一類(lèi)的dye。

5)如果實(shí)在避無(wú)可避，找一臺(tái)可以做光譜掃描的顯微鏡，做 spectral unmixing。