顯微鏡百科 -沒有熒光顯微鏡怎樣用有普通光學(xué)顯微鏡測凋亡

沒有熒光顯微鏡怎樣用有普通光學(xué)顯微鏡測凋亡
信息分類:技術(shù)應(yīng)用 日期: 2011-6-15 9:44:22
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用細胞凋亡檢測試劑盒(POD)(Tunnel法)應(yīng)該可以用普通顯微鏡觀看的�?梢杂糜诩毎榔虮鶅銮衅�
工作原理:
凋亡的特征是內(nèi)源性核酸內(nèi)切酶被激活,細胞自身的染色質(zhì)或DNA被切割,出現(xiàn)單鏈或雙鏈切口,并產(chǎn)生與DNA斷點數(shù)目相同的3-OH末端。末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶可以將地高辛標記的dUDP標記至3-OH末端,DIG-dUDP結(jié)合在DNA斷點部位,可以通過生物標記的抗地高辛抗體反應(yīng)后,再結(jié)合鏈霉親和素-過氧化物酶,然后加入顯色底物DAB予以顯色,凋亡的細胞胞核呈黃色,從而可以在顯微鏡下觀察著色的凋亡細胞。
工作原理:
凋亡的特征是內(nèi)源性核酸內(nèi)切酶被激活,細胞自身的染色質(zhì)或DNA被切割,出現(xiàn)單鏈或雙鏈切口,并產(chǎn)生與DNA斷點數(shù)目相同的3-OH末端。末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶可以將地高辛標記的dUDP標記至3-OH末端,DIG-dUDP結(jié)合在DNA斷點部位,可以通過生物標記的抗地高辛抗體反應(yīng)后,再結(jié)合鏈霉親和素-過氧化物酶,然后加入顯色底物DAB予以顯色,凋亡的細胞胞核呈黃色,從而可以在顯微鏡下觀察著色的凋亡細胞。
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