三維影像可視作整體或更精細地觀察單個斷面
共焦掃描顯微術(shù)
顯微技術(shù)近年來的發(fā)展是共焦掃描
顯微鏡(confocal scanning microscope,
CSM)的產(chǎn)生。共焦掃描顯微鏡有著比其他形式的
光學(xué)顯微鏡分辨率更高、對
比度更強、平面視圖(view)更薄的特點。由于CSM能產(chǎn)生三維視圖,所以
CSM有助于數(shù)字處理,通過數(shù)字處理,薄的光學(xué)斷面的影像可以重新組合為合
成的三維影像。這些三維影像可視作整體或更精細地觀察單個斷面。共焦掃描顯
微鏡普遍應(yīng)用于亮視野、暗視野和熒光顯微技術(shù)中,而且正發(fā)展到用于透射和偏
光顯微技術(shù)。
共焦(有相同的焦點)顯微技術(shù)中,必須使用兩個透鏡來聚焦樣品。共焦掃
描顯微鏡能在連續(xù)的焦點平面上截取光學(xué)斷面(稱為Z系列),而使用光闌可在
任何給定時間內(nèi)僅僅聚焦樣品的一個小區(qū)域。來自焦點平面的光進入目鏡,消除
任何散射光,散射光可以使影像模糊。聚焦的光束在樣品表面移動,掃描樣品。
因為在任何給定的時間內(nèi)僅有小部分體積被照亮,所以需要掃描,并且必須收集
許多這樣的小體積以獲得樣品的完整影像。