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用顯微鏡直接檢查菌數-微生物實驗光學儀器

信息分類:生命科學資訊    作者:YIYI發(fā)布 

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顯微鏡直接檢查菌數-微生物實驗光學儀器


    由于用顯微鏡直接檢查菌數不易辨明微生物孢子的死活,故需用人工培養(yǎng)的
方法予以稀釋后,再根據倍數直接從長出的單菌落統(tǒng)計每克中所含的活袍子數。

    例如測定“5406" 菌劑時,先稱取碾碎的”5406" 樣品1 克,倒入盛有“毫
升水的三角玻瓶里( 瓶里裝有玻璃珠或粗砂粒20-30 粒,事先連水進行高壓滅菌
) ,另加”脫溫“擴散劑1 滴( 或加5%的洗衣粉水溶液1 毫升) ,振搖20分鐘,
使孢子勻散水里( 不要搖濕棉花塞) ,這就把菌劑稀釋了100 倍。再取滅菌吸管
或注射器吸出菌液I 毫升,注入盛有9 毫升滅菌水的試管里,振搖勻散后,繼續(xù)
如法往下擴大。由于吸管或注射器管壁上能沾附大量泡子,所以每次注入試管后,
要反復吸吐滅菌水幾次,盡量洗下壁上的孢子,以減少誤差。有條件的工廠,每
級稀釋都用三角瓶,每次換用另一枝吸管,這樣做會更準確些。擴大多少倍,可
以根據菌劑的外觀而定。上等品擴大到6 、7 、8 個試管時,就稀釋到1 億、10
億和100 億倍了。

    各經振搖幾分鐘,就用原吸管分別從8, 7, 6 號試管中吸出1 毫升( 如果作
3 次承復,就各在同一管里吸出3 次) 。注入滅菌培養(yǎng)皿中,皿蓋上用蠟筆編號
. 然后在每個皿里倒入45℃左右的培養(yǎng)基15毫升,并趁熱輕輕搖勻,使培養(yǎng)基平
鋪皿底,不沾到皿蓋上。冷凝后,把皿翻轉,平放在28℃溫箱里,一般5 天左右
取出計數。培養(yǎng)基和溫度合適,2~ 3天內就可以檢查。

    計數的方法是: 取出培養(yǎng)皿,迎光察看,如果培養(yǎng)基內外長出黃色圓形小點,
以后逐漸變白( 或轉紅) ,針尖觸它比較硬,不易挑下,這就是"5406 “的菌落。
如果第6 號試管飽子液所做的平皿出現1 個菌落,就可以推定每克茵劑含有1 億
個活抱子,如果7-號皿出現I 個菌落,就是每克菌劑含有10億個活泡子;8號皿如
出現1 個菌落,就是每克菌劑含有100 億個活抱子。如果8 號皿里出現100 個菌
落,就可以推定每克菌劑中含有活抱子高達10000 億個。一般每級用3 個培養(yǎng)皿,
采用9 個皿的活抱子數平均值刁‘比較準確。月前在國內大多采用這個方法,實
際的數字要比這樣推算的小得多,因為每次用水稀釋10倍,抱子量的擴大往往只
有3~5 倍。但是大家采用同一的方法,有個統(tǒng)一的標準,也就知道菌劑的相對質
量了。

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