熒光顯微鏡使用注意事項
(1)熒光標本不能久存,在強光特別是紫外光的照射下會很快褪色,
因此常在仔細觀察標本之前照相存檔。因熒光微弱,在人的眼睛暗適應
后看起來還很明亮的物體,實際上比普通顯微攝影需要增加幾倍的曝光時間,
故應使用感光速度快的全色底片和彩色底片,
如200ASA(24DIN), 400ASA(27DIN)和600ASA的感光片。
(2)熒光顯微鏡燈泡壽命為200h,啟動次數(shù)越多,燈泡壽命越短。
高壓汞燈啟亮后,不得在5min內(nèi)關(guān)閉,一經(jīng)關(guān)閉需冷卻后才可重新開啟(一般30min后),
否則汞燈壽命縮短。工作間隙時間短時,不要關(guān)燈和停機。新燈泡使用時記錄時間。
(3)攝影時,選用鏡口率大的物鏡與低倍照相目鏡配用,以提高分辨力。
(4)因照明光源含有
紫外線,眼睛應避免看到光源,常在載物臺前上方有黃色遮光板予
以保護,以防紫外線損傷視網(wǎng)膜。
(5)電源應裝配穩(wěn)壓器,否則電壓不穩(wěn),不僅降低高壓水銀汞燈的使用壽命,而且影響
鏡檢的效果。
(6)根據(jù)生物體的組織、細胞、細胞器、微生物、病毒等要求選擇激發(fā)光。激發(fā)濾光鏡和
熒光色素的應用上都必須適合被檢物體。表8-2是一些實例應用。
(7)每種熒光染料對激發(fā)光的吸收和熒光發(fā)射都有高度的選擇性和特異性。要提高背
景物的熒光強度,需選用熒光顯微鏡的光源(波長較短的光)和適于被檢熒光物最佳吸收光
譜的激發(fā)濾光鏡片。
(8)每次檢查時間不要超過90min。超過90min,超高壓汞燈發(fā)光強度逐漸下降,熒光減
弱。標本受紫外光照射15min,熒光明顯減弱。