相差
顯微鏡觀察研究骨髓內(nèi)的細(xì)胞結(jié)構(gòu)特點(diǎn)
在骨髓中,存在許多不同的細(xì)胞族群,如:血源性干細(xì)胞、紅血球前
趨細(xì)胞、嗜中性球前趨細(xì)胞、嗜酸性球前趨細(xì)胞、嗜堿性球前趨細(xì)胞、紅
血球、嗜中性球、嗜酸性球、嗜堿性球、血小板、單核球、巨核細(xì)胞、間
葉干細(xì)胞、造骨細(xì)胞的前趨細(xì)胞、造骨細(xì)胞、破骨細(xì)胞等。在眾多細(xì)胞族
群中,要如何分離并純化骨髓間葉干細(xì)胞,是當(dāng)前的一個(gè)難題。
依據(jù)骨髓間葉干細(xì)胞的特性,綜合了以下幾種可能的方法。
一、以ammonium chloride/EDTA 處理骨髓細(xì)胞,此種方法可將無(wú)核的紅
血球溶解,剩下的則為有核的骨髓細(xì)胞,這種方法所得到的有核細(xì)胞仍是
相當(dāng)複雜,無(wú)法得到較純的干細(xì)胞。
二、將骨髓細(xì)胞培養(yǎng)于培養(yǎng)皿中,培養(yǎng)后,將懸浮未貼附的細(xì)胞洗去。
三、使用不同孔徑的過(guò)濾器
(filter),依據(jù)細(xì)胞的大小分離出不同的細(xì)胞族群。四、使用比
重梯度分離法,離心后,進(jìn)行培養(yǎng)。五、細(xì)胞表面標(biāo)記(CD marker),利用
細(xì)胞上特有的細(xì)胞表面標(biāo)記為抗原,以專(zhuān)一的抗體去結(jié)合抗原,再用磁性
細(xì)胞分類(lèi)機(jī)(magnetic cell sorter, MACS),或是螢光激化細(xì)
胞分類(lèi)機(jī)(fluorescence-activated cell sorter, FACS)將標(biāo)記的細(xì)胞
分離出來(lái)。此種方式所獲得的細(xì)胞最純,且可使用多個(gè)不同的細(xì)胞標(biāo)記來(lái)
做多次篩選