蘇木素伊紅(HE)染色試劑
Hematoxylin之氧化劑與媒染劑
Hematoxylin對(duì)組織具有極小之親合力,除少數(shù)組織外,染液
須含有蘇木(Hematein)與金屬染媒方有辦法染色。
Hematein為Hematoxylin之氧化產(chǎn)物,其構(gòu)造類Hematoxylin,
其由Hematoxylin轉(zhuǎn)變?yōu)镠ematein可由暴露于空氣中而成,如
Delficld染色液。此自然成熟過(guò)程須要時(shí)間,但有一些化學(xué)氧
化劑可助其迅速完成熟。如氧化汞、碘酸鈉與高錳酸鉀。
Hematoxylin溶液中之溶劑PH質(zhì)對(duì)氧化速率有一定之影響。
中性水溶液于數(shù)小時(shí)內(nèi)會(huì)形成Hematein,堿性溶液較快速
,酸性溶液則較緩慢。
Hematoxylin氧化為Hematein 之過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生連續(xù)之化學(xué)變
化并會(huì)形成沉淀,因此每次使用此類氧化劑前須加以過(guò)濾。
一鞍使用Hematoxylin而不使用Hematein ,因后者易氧化兒
產(chǎn)生絮集。溶液中須保留一些Hematoxylin以補(bǔ)充氧化所產(chǎn)生
之染料。
良好之Hematoxylin溶液須要染媒之存在,其作用為連接染料
與組織。但金屬與染料之覆合物呈現(xiàn)大分子之構(gòu)造兒非金屬
染媒本身。
有時(shí)染媒本身亦具有氧化劑功能而加速使Hematoxylin變?yōu)?/div>
Hematein。配制穩(wěn)定之染媒與染料混合溶液時(shí),須選擇引起
氧化最小作用者,如Ammonium Alum.、Potassium Alum、
Phosphotungstic Acid、Phosphomolybdic Acid。強(qiáng)氧化作用之
染媒可使用于用后丟之場(chǎng)合,如Weigert's Iron Hematoxylin使
用Ferric Chloride為強(qiáng)氧化劑,其使用前方配制,而于3、4
小時(shí)后即須丟棄。其他氧化劑染媒有Feric Acetate & Ferric Alum.。
染媒與染料之料合稱為“Lake”,對(duì)Bematein-Mordant混合物
而言,此“Lake”呈正電并作陽(yáng)離子性或堿性染料。被此“Lake”
染色之組織成分有時(shí)稱為“嗜堿性”(Basophilic)。一些帶有
酸性根之組織無(wú)法以傳統(tǒng)之堿性染料之染色而可由“Lake”
加以染色。于Hematoxylin溶化使用之金屬染媒有鋁、鐵、銅、
鎢、鋇、鉻。其中最常用者為鋁與鐵。
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