細(xì)胞中萃取出色素實(shí)驗(yàn)簡介-細(xì)胞研究顯微鏡
冷凍干燥造成大量損失而且葉綠素廣泛降解,而葉黃素在1天內(nèi)降低25﹪,328天減少80﹪。
所以并不推薦用此保存方式。
從細(xì)胞中萃取出色素要比一般”溶劑-溶質(zhì)”作用來得復(fù)雜,溶劑首先需穿透細(xì)胞壁,溶解色素體膜上的脂肪及脂蛋白,萃取的效率主要取決于能對抗細(xì)胞壁、溶劑的穿透及溶解特性、萃取所需時(shí)間、其他可能干擾的機(jī)制等。不同藻類細(xì)胞壁成份不同,如具有盔甲的窩鞭毛藻類、含矽的矽藻、厚壁的綠藻及多糖體細(xì)胞壁的藍(lán)藻,使得因試驗(yàn)?zāi)康�、對象,所使用溶劑與萃取方式而改變。萃取技術(shù)所需考量為:
(一) 萃取能力:所有的色素需能完全從浮游藻類中萃取出。
(二) 忠實(shí)度:能萃取出色素,但不會造成產(chǎn)物變化,需避免葉綠素酵素(chlorophyllase enzymes)活化,de-metallation、allomerization、epimerization of chlorophylls and degradation or isomerization of the carotenoids,使用低溫中性萃取溶劑在黑暗中快速進(jìn)行可降低色素降解,當(dāng)然所萃取出的色素能穩(wěn)定存在該溶劑中,直至
測量。
(三) 可匹配:如果樣本最后以高效能液相層析儀分析,就需考量溶劑是否適合該分析系統(tǒng)。
(四) 精確度:重覆分析能達(dá)高精確度。
(五) 簡單化:操作過程簡單、步驟少、在野外能大量且快速處理