穿透光光源由上至下,先通過(guò)一光罩,控制光源開(kāi)關(guān),可避免長(zhǎng)時(shí)
間取像時(shí)光源影響細(xì)胞生長(zhǎng),接著通過(guò)濾鏡產(chǎn)生不同的相位差,濾鏡顏
色可依需求選換,相位差需配合物鏡倍數(shù),
購(gòu)置物鏡為5,10,20,40 倍,所搭配相位差依序?yàn)?ph0,ph1,ph2,ph2,穿透標(biāo)
本后主要分為兩條光路,目鏡光路與照相機(jī)光路,為了取得最佳影像,
兩條光路由一個(gè)開(kāi)關(guān)控制,開(kāi)始先用人眼取得欲取像之位置,將開(kāi)關(guān)移
至照相機(jī)做長(zhǎng)時(shí)間取像,
在使用顯微鏡時(shí),除了確定光路的濾片與放大倍率,還需注意光軸校正,
光軸正確才能確保觀察范圍的光源照射充份
且均勻,還有培養(yǎng)皿需水平放置在移動(dòng)平臺(tái)上,避免影響聚焦的正確性
螢光光源亦通過(guò)光罩,接著通過(guò)一單向?yàn)V鏡,只濾除標(biāo)本反射后的
光線,
購(gòu)置的螢光濾鏡有異硫氰酸螢光素(Fluoresceinisothiocynate,F(xiàn)ITC)
(觀察綠色螢光激發(fā))及 Texas Red(觀察紅色螢光激發(fā)),在使用螢光顯微鏡前,
先用穿透光光源找到細(xì)胞位置,由于穿透光光路與螢光光路共用,
使用穿透光必須將螢光濾片移致空格處,在關(guān)掉螢光光源之后,
應(yīng)避免在 30 分鐘內(nèi)再度打開(kāi),在使用 200 小時(shí)之后,需更換螢光光源