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實習介紹之DNA制備與純化-光學顯微鏡常識

信息分類：生命科學資訊　　　　作者:YIYI發(fā)布　

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注射用DNA制備與純化
材料：
1.    經(jīng)超高速離心分層抽取之 DNA
2.    LMP agarose
3.    電泳設(shè)備
4.    5 M NaCl
5.    3 M NaOAc，pH 6.0
6.    100% 酒精
7.    TE
8.    phenol，phenol/chloroform（1:1 v/v）等體積混合液
9.    65℃水浴槽
   10.  1 ml 注射針筒及 0.22 mm 孔徑過濾膜
 實驗步驟：
1.    依據(jù)質(zhì)體構(gòu)筑時的圖譜，選擇適當?shù)南拗泼笇①|(zhì)體的骨架（backbone）切除。
2.    將切割完全之 DNA 以含 EtBr 的 LMP 進行電泳分離 DNA 及骨架。
3.    待分離完成后，在(長波)紫外燈下以刀片切下欲純化的膠，分裝至微量離心管，平均每管約400 ml。
4.    將微量離心管置  65℃ 水浴槽中 約5'，觀察至膠完全融解。
5.    加入 20 ml 5M NaCl，再放入 65℃ 水浴槽中約1'。
6.    取出微量離心管后，依序以phenol萃取兩次、phenol/chloroform萃取一次、chloroform萃取一次。
7.    加入 1/20 體積之3 M NaOAc 及 2.5 倍體積之純酒精沉淀。
8.    離心14000 rpm，10'后，丟棄酒精。
9.    加入 70% 酒精。接著離心14000 rpm，1' 后去酒精。
   10.   風乾后溶于適量的TE。
   11.   取些許之DNA定量（以膠電泳方式比對 λ/H3 之 DNA 標記）。
   12.   將 DNA 之濃度以 TE 調(diào)整至 10-20 ng/ml。
   13.   以 0.22 mm 孔徑之過濾膜過濾后，分裝小量至微量離心管，并儲存于 -80℃，
  爾后每進行一次顯微注射即取出一小管，且不再重覆使用。



血管正面的縫合最好紮實，因為背面會比較難縫。



看起來不難

實際應(yīng)該很難XD



話說那臺比人還高的多人解剖體視顯微鏡 



研究設(shè)備及器材
項目 器材名稱
數(shù)量
項目
器材名稱
數(shù)量
1
解剖顯微鏡
一臺
6
地毯
一塊
2
保麗龍球
數(shù)個
7
魔鬼氈
一片
3
蟑螂
數(shù)只
8
砝碼
數(shù)個
4
壓克力板
一片
9
木板
一塊
5
鐵絲
數(shù)支
10
飼育箱
四個

本文由出自上海光學儀器廠，轉(zhuǎn)載請注明
本文網(wǎng)址： http://m.xinmaotiandiyuan.com/html/1767.html 顯微鏡百科
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