實驗名稱：Spirochetes
　
　
實驗原理：
Phase-contrast Microscopy是把位像差轉(zhuǎn)成亮度差，用以觀察活菌體的內(nèi)部構(gòu)造。
Dark field microscopy是利用繞射光，用以觀察透射光線難以觀察的菌體。
實驗?zāi)康模河^察螺旋菌的形態(tài)。
實驗材料：Phase-contrast Microscope 、Dark field microscope、Spirochetes。
實驗方法：
　　我們可以直接用Phase-contrast Microscopy來觀察，標(biāo)本不需要等殊的準(zhǔn)備或染色，即可產(chǎn)生對比之顯像作用。
　　除此之外，也可用Dark field microscopy法，藉由1000X的darkfield油鏡來觀察。要注意的是玻片的厚度是重要的，必須有1.0~1.1mm厚。
實驗結(jié)果：
　　Treponemes若出現(xiàn)在損傷物質(zhì)中，是長的(5~20μm)、纖細(xì)的、緊密螺旋的Spirochetes，移動很慢(呈罕見的螺旋形移動)且可能在中央呈現(xiàn)彎曲。
　　對于這種難培養(yǎng)的微生物，用Phase-contrast Microscopy，即可清楚地看出它的形態(tài)。若用Dark field microscopy來觀察，也可以看出形態(tài)。
實驗討論：
　　Phase-contrast Microscopy是由荷蘭的一位科學(xué)家Fritz Zerniche所發(fā)明的，并在1935年獲得諾貝爾物理獎。主要的原理是利用改變通過標(biāo)本的光線的位相關(guān)系，而產(chǎn)生對比之顯像作用。
　　用Dark field microscopy法觀察時，由于充滿著的活spirochetes可能有高的傳染性，所有的設(shè)備、病人樣本都要小心處理，立即拋棄受汙染的物質(zhì)。看到的細(xì)菌在空泡、亮光處，為透明實像。若用特殊處理的顯微鏡看則是黑色較大的虛像。
　　另外，我們也可以用間接免疫螢光法來確認(rèn)細(xì)菌，如Treponema pallidum。將專一性抗體溶液加在切片上，再加入標(biāo)有螢光物質(zhì)的專一性抗免疫球蛋白之抗體，然后在紫外線螢光顯微鏡下觀察。
　　Treponema pallidum被固定在玻片上并加入病人的血清。然后沖洗并加入標(biāo)有螢光物質(zhì)的專一性抗免疫球蛋白之抗體。假如有T. pallidum的病人血清和這種抗體反應(yīng)，細(xì)菌將被染色(呈＋反應(yīng)，見下圖)。假如沒有反應(yīng)發(fā)生，螢光抗體將從抹片上被沖走，也就不會有螢光細(xì)菌被看到了(呈－反應(yīng))。
　　為了避免產(chǎn)生交叉反應(yīng)，病人血清要先用Reiter treponeme的抽取物來吸附，我們稱這種方法為fluorescent treponemal antibody absorption(FTA-ABS)test，有很高的專一性。
　　其他血清學(xué)上的IF test有：
VDRL(Veneral Disease Research Lab)、RPR(Rapid Plasma Reagin) test：測量病人血清中cardiolipin antigen的凝集。
MHA.TP(Microhaemagglutination test for T. pallidum.)：針對T.pallidum 所做的微小紅血球凝集試驗。
TPCF(T. pallidium compliment fixation test)：檢出率高，但每天都要做一次。
TPI(T. pallidum immobilization test)：比較貴，主要是使螺旋菌失去運動性，而固定不動。
　　Microscopy適用于初期、第二期和生殖期，由skin lesions取分泌物，而不是從oral lesions。因為含有Spirochetes的正常口腔中通常有非致病性卻又像T. pallidum的細(xì)菌，導(dǎo)致誤診機率大。
　　其他的染色法有：
Gimesa stain：先用methanol細(xì)流，再用Gimesa solution。但是染起來不很理想。
Fontana stain：先用媒染劑細(xì)流，再用silver nitrate solution。
Negative Demonstration of Spirochetes--India ink method：背景為墨水的黑色，細(xì)菌處是空泡、透明狀。
　　由于Spirochetes不但厭氧且需要很高的營養(yǎng)，所以大部分是培養(yǎng)不出的。Treponema至目前為止不能用人工培養(yǎng)基培養(yǎng)。
　　至于螺旋體的抗藥性很弱，只有人和人之間的直接接觸才會有高傳染性，間接感染的情況則相當(dāng)?shù)汀?